培養(yǎng)箱里，我們的“小勞模"細胞們每天忙著分裂增殖，為我們的實驗貢獻著力量。然而，有時候，這些小家伙們卻會突然“罷工"，傳代后的增殖速度變得慢如蝸牛，仿佛一夜之間愛上了慢生活。這背后究竟是什么原因呢？怎樣才能讓細胞們恢復干勁呢？ 請看下文：
接種密度低
你知道嗎？很多細胞都有密度依賴。細胞自身會分泌一些因子到培養(yǎng)基中促進周圍的細胞生長（旁分泌）。細胞密度太低，這種化學信號的傳遞減弱，細胞狀態(tài)受到影響。接種密度越低，增殖越慢，甚至不增殖。
解決方案：根據(jù)細胞生長速度確定合適的傳代比例和接種密度。如果細胞已經(jīng)傳稀了，可以耐心繼續(xù)培養(yǎng)，或?qū)⒓毎匦聜鞯礁〉钠髅笾?，增加密度?/span>特別提醒！T25培養(yǎng)瓶底面積為25cm2，10cm培養(yǎng)皿底面積是55cm2，所以一個T25傳兩個10cm皿約等于1：4傳代，而不是1：2
培養(yǎng)基、血清不合適
想象一下，你突然來到一個全新的城市上學上班，面對全新的環(huán)境，是不是也需要適應(yīng)一段時間呢？細胞突然被換到新的培養(yǎng)基和血清中，也會出現(xiàn)水土不服的情況，特別是對血清要求高的細胞。新的培養(yǎng)基或血清不對細胞胃口時，導致它們“食欲不振"，生長速度自然就慢了下來。
解決方案：
檢查新培養(yǎng)基和原培養(yǎng)基的配方是否有差異，是否需要額外添加試劑，成分盡量保持一致。新培養(yǎng)基和原培養(yǎng)基混合培養(yǎng)1-2代，讓細胞慢慢適應(yīng)，如果細胞正常生長，再完quan替換為新的培養(yǎng)基。如果它們實在適應(yīng)不了新培養(yǎng)基，還是換回原培養(yǎng)基，畢竟實驗不等人??！另外，記得定期換液，別等培養(yǎng)基都變成金黃色了才換，這無異于把細胞活活餓死！
細胞受損
在細胞傳代的過程中，如果發(fā)生一些“工傷"事故，比如胰酶消化時間過長，導致它們受傷；消化時間過短，細胞們還沒完quan分開，就被強行“搬家"了，導致細胞膜受損；重懸時瘋kuang吹打，生怕吹不均勻，結(jié)果把細胞打得半死不活，都會導致細胞增殖速度變慢。
解決方案：
傳代時嚴格控制胰酶消化時間，控制吹打次數(shù)和力道。如果細胞已經(jīng)受損了，傳代后漂浮細胞和碎片很多，可以嘗試提高血清濃度（總量不超過20%），幫助它們恢復元氣。如果傷情嚴重，搶救失敗，那還是重新復蘇吧！
細胞衰老
原代細胞以及一些有限傳代的細胞系，隨著傳代次數(shù)增多，細胞生長速度逐漸減慢，最終停止增殖。
解決方案：
細胞衰老是自然法則無法避免，但我們可以通過優(yōu)化培養(yǎng)條件和操作，讓細胞盡可能保持好的狀態(tài)，并及時進行實驗。對于有限細胞系，要記得凍存早期代次作為備份。對于原代細胞，則要規(guī)范提取步驟，保證細胞質(zhì)量穩(wěn)定，實驗重復性才能更好。
雖然細胞不增殖的時候我們心急如焚，但也讓我們更加深入了解自己細胞的特性。通過不斷探索和實踐，當我們找到了z適合的培養(yǎng)方案，細胞們會更加健康、快樂地生長著。祝各位同學和自己的細胞們相處愉快！
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