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上海禾午生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第4年

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P20611-pHR_Gal4UAS-HSV TK_IRES_mC_pGK_tBFP質(zhì)粒
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pHR_Gal4UAS-HSV TK_IRES_mC_pGK_tBFP質(zhì)粒
啟動(dòng)子Gal4
復(fù)制子pUC
克隆菌株Stbl3
培養(yǎng)條件37度
質(zhì)粒宿主哺乳細(xì)胞,慢病毒
質(zhì)粒用途蛋白表達(dá)
片段類型ORF
片段物種病毒
原核抗性Amp
熒光標(biāo)記紅色,藍(lán)色

一、載體構(gòu)建的基本實(shí)驗(yàn)步驟
(1)目的DNA片段和載體的制備;
(2)目的DNA片段和載體的連接;
(3)連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化;
(4)克隆篩選。
(5)測(cè)序驗(yàn)證及結(jié)果交付

 

二、詳細(xì)內(nèi)容
1、以PCR擴(kuò)增為基礎(chǔ)的各類載體構(gòu)建,如大腸桿菌表達(dá)載體、酵母表達(dá)載體、桿狀病毒表達(dá)載體、哺乳動(dòng)物表達(dá)載體;報(bào)告基因載體等;
2、基因定點(diǎn)突變,包括單點(diǎn)突變,多點(diǎn)突變,基因缺失等;
3、載體元件替換和改造;
4、siRNA載體和miRNA表達(dá)載體構(gòu)建;
5、過(guò)表達(dá)載體構(gòu)建。

 

pLKO.1-EGFP-Puro-DNMT3L-shRNA3(human)基因沉默質(zhì)粒
pCold-SUMO-PA-X(virus)蛋白表達(dá)質(zhì)粒
Tet-pLKO-sgRNA-Puro基因編輯,誘導(dǎo)質(zhì)粒
Cbh_v5 AAV-CBE N-terminal基因編輯質(zhì)粒
pLentiCRISPRV2-CFP基因編輯質(zhì)粒
pLKO.1-EGFP-Puro-RNF216-shRNA1基因沉默質(zhì)粒
pET28a-K-Ras蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-CD19-shRNA2(human)基因沉默質(zhì)粒
pACYC177-T7蛋白表達(dá)質(zhì)粒

 

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