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武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司

PriCells: 正常滑膜細胞原代培養(yǎng)

時間:2021-10-14 閱讀:178
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PriCells: 正?;ぜ毎囵B(yǎng)
 
實驗材料:
1. 實驗動物:大鼠、兔,人手術(shù)切除的關(guān)節(jié)等;
2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;
3. 培養(yǎng)液:RPMI1640培養(yǎng)基,補加15%小牛血清;
 
實驗方法:
1. 將大鼠處死后,用75%酒精消毒;
2. 用手術(shù)剪剖開其四肢皮膚與肌肉,暴露長骨兩端的關(guān)節(jié),取出關(guān)節(jié)面滑膜組織置于盛有緩沖液的培養(yǎng)皿中;
3. 剔除滑膜組織外層結(jié)構(gòu)及周邊軟骨組織,用緩沖液洗2—3次;
4. 將滑膜組織置于盛有少量小牛血清的培養(yǎng)皿中,剪碎成1mm×1mm×1mm大小的植塊;
5. 將制備的植塊接種到螺旋口培養(yǎng)瓶中。反轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使植有組織塊的一面朝上,加入培養(yǎng)液,蓋好瓶蓋。將培養(yǎng)瓶放入含5%CO2的培養(yǎng)箱中在37℃條件下進行培養(yǎng);
6. 培養(yǎng)4h后,組織塊較牢黏附于瓶底時,再輕輕反轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,繼續(xù)培養(yǎng);
7. 培養(yǎng)3d后換培養(yǎng)液;
 
PriCells提供:
1. 各種原代細胞特制基礎培養(yǎng)基;
2. 各種原代細胞培養(yǎng)特制添加劑;
3. 原代細胞分離試劑盒;
4. 原代細胞鑒定試劑盒;
5. 原代細胞總蛋白質(zhì)抽提物;
6. 原代細胞總RNA;
7. 原代細胞總DNA;

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