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原代細胞的取材基本要求介紹
原代細胞（primary culture cell）是指從機體取出后立即培養(yǎng)的細胞。有人把培養(yǎng)的第1代細胞與傳10代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。原代細胞不僅廣泛應(yīng)用于分子、細胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究，如蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)、細胞株（系）研究、DNA，RNA和遺傳學(xué)研究等，還可應(yīng)用于當今熱門的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。
原代細胞的培養(yǎng)
原代細胞的培養(yǎng)是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進行培養(yǎng)。因此，較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng)，此時的細胞保持原有細胞的基本性質(zhì)，如果是正常細胞，仍然保留二倍體數(shù)。但實際上，通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。
常用的原代細胞的培養(yǎng)有組織塊培養(yǎng)和分散細胞培養(yǎng)。
組織塊培養(yǎng)是將剪碎的組織塊直接移植在培養(yǎng)瓶壁上，加入培養(yǎng)基后進行培養(yǎng)。
分散細胞培養(yǎng)大致步驟為：
將動物組織從機體中取出離散成單個細胞(常用胰蛋白酶)，置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細胞得以生存、生長和繁殖(注意整個過程無菌)。
原代細胞的質(zhì)量取決于多個因素：組織、培養(yǎng)基、特別是它還與實驗人員分離組織的技術(shù)息息相關(guān)。如果你對分離組織不甚精通或者很難保證組織來源地穩(wěn)定性，市售的原代細胞是一種不錯的選擇。
細胞系培養(yǎng)相當成熟且普遍，但有時會得到一些難以解釋的結(jié)果。想不想得到更多符合體內(nèi)正常生理條件的數(shù)據(jù)？從細胞系轉(zhuǎn)向原代細胞，情況一定會有所好轉(zhuǎn)。原代細胞培養(yǎng)模擬了體內(nèi)的狀態(tài)，能讓你獲得更多這樣的數(shù)據(jù)。
原代細胞的取材基本要求
（1）取材要注意新鮮和保鮮 新鮮組織易于培養(yǎng)成功，取材時應(yīng)盡量在4~6h內(nèi)能制作成細胞，盡快入箱培養(yǎng)，若不能即時培養(yǎng)，應(yīng)將組織浸泡于培養(yǎng)液內(nèi)，于4℃存放。若組織塊較大，應(yīng)在清除表面血、壞死組織、脂肪和結(jié)締組織后，切碎于培養(yǎng)液內(nèi)4℃存放，但時間不能超過24h.對于已切碎的組織或血液、淋巴組織應(yīng)加入含10%二甲基亞砜的培養(yǎng)基，按細胞凍存方式于液氮中冷凍保存。
（2）取材應(yīng)嚴格無菌 所取標本材料應(yīng)在無菌條件下進行，為了確保無菌，對所取材料若疑有污染的可能，應(yīng)將所取組織在含高濃度抗菌素（400單位/mL）甚至加入適量的***或10%達克寧液的培養(yǎng)液內(nèi)于4℃下存放2小時以上，再用PBS洗2~3次，以確保所取材料無菌。要用無菌包裝的器皿或事先消毒好的帶少許培養(yǎng)液（內(nèi)含400單位/mL抗菌素）的小瓶等便于攜帶的物品來取材，所取材料應(yīng)避免接觸有毒有害的化學(xué)物質(zhì)，如碘、汞等。
（3）取材和原代細胞制作時，要用鋒利的器械，如手術(shù)刀或剃須刀片切碎組織，盡可能減少對細胞的機械損傷。
（4）要仔細去除所取材料上的血液、脂肪、壞死組織及結(jié)締組織，切碎組織時應(yīng)避免組織干燥，可在含少量培養(yǎng)液的器皿中進行。
（5）原代細胞取材時要同時留好組織學(xué)標本和電鏡標本。對組織的來源、部位、包括供體的一般情況要做詳細的記錄，以備以后查詢。
（6）取材應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等，一般來講，胚胎組織較成熟個體組織容易培養(yǎng)，分化低的較分化高的組織容易生長，腫瘤組織較正常組織容易培養(yǎng)。取材時應(yīng)盡量選用易培養(yǎng)的組織進行培養(yǎng)。