原代細胞培養(yǎng):原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細胞進行的**培養(yǎng),也叫*代培養(yǎng)。將動物機體的各種組織從機體中取出,經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養(yǎng)。
動物組織經(jīng)胰蛋白酶等消化、分散,獲得單個細胞,再生長于培養(yǎng)皿中。大多數(shù)組織可以制備原代細胞,但生長的快慢及難易程度不一。甲狀腺細胞生長較慢,只用于某些**的病毒如豬傳染性腸胃炎病毒的培養(yǎng)。
原代細胞的培養(yǎng)
原代細胞的培養(yǎng)是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進行培養(yǎng)。因此,較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng),此時的細胞保持原有細胞的基本性質(zhì),如果是正常細胞,仍然保留二倍體數(shù)。但實際上,通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。
常用的原代細胞的培養(yǎng)有組織塊培養(yǎng)和分散細胞培養(yǎng)。
組織塊培養(yǎng)是將剪碎的組織塊直接移植在培養(yǎng)瓶壁上,加入培養(yǎng)基后進行培養(yǎng)。
分散細胞培養(yǎng)大致步驟為:
將動物組織從機體中取出離散成單個細胞(常用胰蛋白酶),置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細胞得以生存、生長和繁殖(注意整個過程無菌)。