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血清系列: SERANA胎牛血清低內毒素膠原蛋白 ZETA LIFE胎牛血清

細胞轉染: 活體轉染試劑 LIPO3000轉染試劑高效轉染試劑

支原體清除: 支原體去除試劑

細胞凍存: 無血清細胞凍存液

實驗耗材: 多功能開關器封板膜 PCR & qPCR 孔板 qPCR耗材 PCR耗材

分子試劑: RNA提取等溫擴增克隆突變 PCR系列核酸提取純化核酸染料

細胞增殖與凋亡: 細胞凋亡檢測試劑盒細胞增殖及毒性檢測

Biozellen系列: 鼠尾膠原蛋白 3D基質膠

培養(yǎng)基: 內皮細胞培養(yǎng)基細胞添加劑無血清培養(yǎng)基

ELISA試劑盒: 豬ELISA試劑盒小鼠ELISA試劑盒

TOYOBO（東洋紡）: PCR相關試劑

ZYMO RESEARCH: 試劑盒

Greiner（格瑞納）: 細胞培養(yǎng)小室

IKA（艾卡）: 刀頭

化學發(fā)光底物（ECL）: ECL化學發(fā)光液

PROSPEC系列: 單胺氧化酶

Epigentek系列: 細胞分析試劑盒

微生物檢測: 生化鑒定試劑盒

細胞生物學: 細胞輔助試劑細胞檢測試劑

Corning康寧: 凍存管嵌套/小室

解離試劑: 胰蛋白酶

細胞類-實驗耗材: 細胞培養(yǎng)瓶細胞培養(yǎng)皿細胞培養(yǎng)板

原代細胞: 小鼠原代細胞

植物檢測系列試劑盒: 植物激素系列植物氧化與抗氧化系列植物氮代謝系列植物脂肪酸代謝系列植物固氮作用系列植物呼吸作用系列植物光合作用檢測試劑盒

SERANA: BSA

細胞系: 人源細胞系

生化試劑盒

環(huán)境檢測系列試劑盒（AKEN）: 土壤氧化還原酶系列

類器官培養(yǎng): 培養(yǎng)試劑盒

緩沖器和解決方案: 抗生素培養(yǎng)添加物隱窩增強劑保護液洗滌液凍存液解離液

生物三凝膠基質: 細胞外基質

細胞因子分子: 抑制劑激動劑

生物樣本庫: 類器官

蛋白研究系列: 蛋白緩沖 ALP發(fā)光液 ECL系列轉印膜轉膜封閉 PAGE凝膠試劑盒蛋白電泳蛋白制備免疫檢測

修飾檢測試劑盒: 蛋白修飾檢測試劑盒

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高效轉染質粒大小10646bp、HGF-1牙齦成纖維細胞的操作方法

時間：2021/11/11閱讀：2018

轉染條件

細胞密度：60左右

質粒DNA濃度：648ng/ul

質粒DNA大小：10646bp

培養(yǎng)板：6孔板

轉染試劑用量：8ul

質粒DNA用量：電訊

轉染試劑：AD600150，Zeta Life Advanced DNA RNA轉染試劑

轉染時間：48小時

血清：Z7010FBS-500澳洲胎牛血清

細胞凍存：CE70100T無血清細胞凍存液

細胞活力檢測：K009-500，CCK8

操作方法

提前 1 天接種細胞：細胞匯合度在 60-80%左右，再進行轉染。

核酸復合物制備：將核酸與轉染試劑按照 1:1 關系直接混合，用移液器吹吸 10-15 次混勻，室溫靜止 10-15 分鐘。

在細胞培養(yǎng)基中加入核酸復合物：根據(jù)參考用量在細胞中加入核酸復合物，并輕輕混勻；細胞培養(yǎng)基里面可以含有血清。

細胞換液：轉染 24 小時后對細胞進行正常換液，懸浮細胞轉染過程中不用換液。

分析結果：質粒 DNA 轉染 48-72 小時后熒光檢測轉染效率，48-96 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。若進行穩(wěn)定表達細胞株的篩選，則在轉染后 24-48 小時左右加入適量的藥物進行篩選。siRNA 轉染后 9 小時熒光檢測轉染效率，48-72 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。

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