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深圳市安培生物科技有限公司
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端粒顯示實(shí)驗(yàn)

時(shí)間:2022/12/1閱讀:1263
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簡(jiǎn)介

端粒(telomere)是真核細(xì)胞染色體末端的 DNA 重復(fù)序列,它與多種端粒結(jié)合蛋白結(jié)合在一起,發(fā)揮重要的生物學(xué)功能,在細(xì)胞分裂的過(guò)程中,盡管端粒也會(huì)不斷的縮短,但可以通過(guò)端粒酶的催化,以自身 RNA 為模板進(jìn)行補(bǔ)充,從而代償了這一損失。


端粒的功能保護(hù)染色體末端完整性,穩(wěn)定染色體,保障染色體 DNA 在復(fù)制的過(guò)程中不被縮短,保護(hù)染色體結(jié)構(gòu)基因,防止基因組 DNA 降解、防止染色體末端融合,調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、衰老等作用。


目前,用于端粒顯示實(shí)驗(yàn)的方法主要有 3 種:Southern印跡法、Q-FISH法和qPCR法。


原理

Southern印跡法檢測(cè)端粒長(zhǎng)度的基本原理是盡管不同物種的端粒的重復(fù)序列可存在差異,在同一種生物體內(nèi)為特定序列,如人端粒是由 6 個(gè)堿基重復(fù)序列(TTAGGG)和結(jié)合蛋白組成。通過(guò)與放射性同位素 32P 標(biāo)記的探針 32P-(TTAGGG)n,檢測(cè)末端限制性片段(terminal restriction fragments,TRF)的長(zhǎng)度分布情況,并計(jì)算出端粒長(zhǎng)度的平均值。
 
Q-FISH法檢測(cè)端粒形態(tài)及長(zhǎng)度的基本原理是盡管不同物種的端粒的重復(fù)序列可存在差異,但在同一種生物體內(nèi)為特定序列,如人端粒是由 6 個(gè)堿基重復(fù)序列(TTAGGG)和結(jié)合蛋白組成。因此,對(duì)于端粒長(zhǎng)度的檢測(cè),傳統(tǒng)上可以對(duì)上述重復(fù)序列設(shè)計(jì)探針,采用核酸分子雜交技術(shù)進(jìn)行測(cè)量。
 

QPCR法檢測(cè)端粒長(zhǎng)度的基本原理是盡管不同物種的端粒的重復(fù)序列可存在差異,但在同一種生物體內(nèi)為特定序列,如人端粒是由 6 個(gè)堿基重復(fù)序列(TTAGGG)和結(jié)合蛋白組成。因此,對(duì)于端粒長(zhǎng)度的檢測(cè),傳統(tǒng)上可以對(duì)上述重復(fù)序列設(shè)計(jì)探針,采用核酸分子雜交技術(shù)進(jìn)行測(cè)量?;谝粋€(gè)細(xì)胞中端粒長(zhǎng)度的均值與端粒-單拷貝基因比率(Telomere-to-Single Copy Gene ratio,T/S 比率)有關(guān)的證據(jù),通過(guò)測(cè)量和計(jì)算出 T/S 比率,從而測(cè)量出端粒的長(zhǎng)度。



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安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶,提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑;inviCELL™Platelet lysate無(wú)動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)



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