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深圳市安培生物科技有限公司
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DNA 甲基化測序常用方法2021/8/26
隨著高通量測序技術(shù)(NGS)技術(shù)的發(fā)展,使我們能夠從全基因組水平來分析5’甲基胞嘧啶及組蛋白修飾等事件,由此能夠發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)的基因組學(xué)研究所不能發(fā)現(xiàn)的東西,這就是所謂的“DNA甲基化測序”!DNA甲基...
電泳中的異常現(xiàn)象及其原因分析2021/8/26
跑電泳是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的一項(xiàng)基本技術(shù)。只要做分子生物學(xué)方面的實(shí)驗(yàn),可能或多或少,或早或晚都要跑跑電泳。有時(shí)候,跑電泳跑著跑著也會出現(xiàn)一些奇奇怪怪的現(xiàn)象。下面,談一談跑電泳的過程中可能會發(fā)生的異?,F(xiàn)象,...
【DNA 電泳】教你做果凍:瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)技巧分享2021/8/26
果凍晶瑩剔透,口感QQ的,其實(shí)果凍的原料瓊脂糖,也是我們平時(shí)用來跑電泳的材料,瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)常用以DNA切膠回收,DNA分離和用于佐證DNA是否重組、質(zhì)粒等是否切開。今天我們就來聊聊瓊脂糖凝膠電泳...
【教程】構(gòu)建載體其實(shí)一點(diǎn)也不難!2021/8/26
我們在研究基因的功能時(shí),逃脫不掉的就是為了我們的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,可能需要?gòu)建各種載體,比如表達(dá)載體,克隆載體,基因打靶載體等等。很多人在構(gòu)建載體的時(shí)候都感覺很困難,特別是對于一個(gè)剛進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的新人來說那更是...
表達(dá)融合蛋白時(shí),如何把兩個(gè)基因拼接起來?2021/8/26
A君:我要表達(dá)一個(gè)ras加GFP融合蛋白,怎么設(shè)計(jì)引物?安培君:你的GFP標(biāo)簽蛋白在載體里還是要你自己插進(jìn)去?A君:是我自己插進(jìn)去。安培君:你打算怎樣融合?A君:是不是這樣?酶切A基因,酶切質(zhì)粒,把A...
教你如何做分子構(gòu)建,從此邁向科研達(dá)人!2021/8/25
做過分子實(shí)驗(yàn)的人都知道,要想做的有效率有質(zhì)量是很苦逼的,1個(gè)月做100個(gè)克隆那都是小case,沒點(diǎn)看家的本事怎么行。如果再遇到比較稀有的基因,周旋個(gè)把月,那也是家常便飯。下面就和大家分享一些載體構(gòu)建的...
學(xué)學(xué)序列拼接,想節(jié)省費(fèi)用的千萬別錯(cuò)過!2021/8/25
相信大家PCR之后一般要進(jìn)行測序以保證擴(kuò)增序列的正確性吧?由于測序能力的限制,目前好的公司也只能保證一個(gè)反應(yīng)800bp測準(zhǔn)。如果大家的克隆片斷大于1k,那么勢必要同時(shí)測兩個(gè)反應(yīng),然后將兩個(gè)反應(yīng)得到的序...
你真的了解 TA 克隆嗎?2021/8/25
首先,TA克隆是用于PCR產(chǎn)物的克隆和測序。原理是利用Taq酶能夠在PCR產(chǎn)物的3’末端加上一個(gè)非模板依賴的A,而T載體是一種帶有3’T突出端的載體,在連接酶作用下,可以快速地、一步到位地把PCR產(chǎn)物...
上圖!教你秒懂重組 DNA 技術(shù)常用工具酶!2021/8/25
1分子剪刀——限制性內(nèi)切酶:作用:識別特異序列,切割DNA限制酶的命名是根據(jù)細(xì)菌種類而定,以EcoRI為例:2膠水——DNA連接酶作用:跟限制性內(nèi)切酶對著干,催化DNA中相鄰核苷酸間形成磷酸二酯鍵,使...
如何解決酶切切過頭的問題?2021/8/25
之前談到了酶切切不動的問題。這一次,我們探討一下酶切的另外一端:酶切切過頭的問題。還是按照一貫的做法和思路,發(fā)現(xiàn)主要是兩個(gè)原因?qū)е碌?,解決辦法也是有的。一、酶切時(shí)間過長酶切時(shí)間過長的確有時(shí)候會對目的條...
【技術(shù)】酶切、酶切,切還是不切?2021/8/24
酶切,作為一種常用的分子克隆的手段,如果應(yīng)用得當(dāng),可謂寶刀屠龍,無往而不利;如果應(yīng)用不當(dāng),又會步步維艱。真是讓人歡喜讓人憂愁。酶切,最常見的問題就是切不動和切過了。這些問題比較復(fù)雜。下面,先講一講切不...
瓊脂糖凝膠電泳、酶和試劑的使用等一些注意事項(xiàng)2021/8/24
基因克隆在發(fā)明后的32年,需求一直不斷增加,但是有些小伙伴的重組質(zhì)粒就是怎么樣都構(gòu)建不出來。其實(shí),看似簡單的傳統(tǒng)基因克隆,可是存在著重重陷阱!美國羅林斯研究中心(RollinsResearchCent...
DNA載體構(gòu)建——【干貨】三圖讓你秒懂質(zhì)粒圖譜2021/8/24
很多人拿到一個(gè)質(zhì)粒圖譜,第一反應(yīng)只能是仰天長嘯,這是什么玩意?這些ori、RBS、tet是什么鬼?這些箭頭代表什么,轉(zhuǎn)錄的方向嗎?為什么都不相同,不會“撞車”么?來,看幾張圖,上面的問題就能一一破解。...
為什么不能用質(zhì)粒DNA抽提試劑來提取基因組DNA?2021/8/24
導(dǎo)讀為什么同樣抽提質(zhì)粒DNA的試劑不能用來抽提基因組DNA呢?差別很大么?要買兩種試劑盒真是麻煩??!你還不要不相信,有小伙伴試過,還真沒抽提出來。今天小編就來和大家一起探究下原因!基因組DNA的抽提,...
【技術(shù)貼】DNA 純化實(shí)驗(yàn)的幾種常用方法2021/8/24
DNA純化是分子生物學(xué)研究中經(jīng)常需要用到的一種方法。一般來說,做DNA純化有3個(gè)目的:1.獲得高純度的DNA;2.濃縮DNA;3.用DNA做測序,芯片等生物信息學(xué)方面的實(shí)驗(yàn)。下面,談一談DNA純化的幾...

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