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為了滿足廣大科研工作者的需求，Lonza公司于2010年底推出了革新的4D-Nucleofector細胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)。全新的4D Nucleofector細胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)采用模塊化設(shè)計和導(dǎo)電性聚合物技術(shù)，為使用者提供更加靈活的選擇和更的轉(zhuǎn)染性能。

1、儀器具體介紹：

4D細胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)模塊化設(shè)計，由Core unit（核心單元），和X unit（X功能單元），和/或Y unit（Y功能單元）等功能單元組成，每個功能單元適合于不同的應(yīng)用需求。
型號：4D
廠家：德國Lonza公司
組成：- Core unit（核心單元：為4D-Nucleofector細胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)提供脈沖；
    - X unit（X單元）：支持不同規(guī)格、不同細胞數(shù)的轉(zhuǎn)染平臺；適用于在    16-孔貼壁電轉(zhuǎn)板條中的原位貼壁轉(zhuǎn)染；
    - Y unit（Y單元）——提供24-孔細胞培養(yǎng)板中的原位貼壁核轉(zhuǎn)染平臺

功能搭配：

- 核心單元和各功能單元可以平行拼接或疊放；
- 靈活地選擇和組裝4D細胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)；
- 可操控軟件：實驗者根據(jù)實驗需求，可以自己設(shè)計和存儲實驗設(shè)置；
- USB接口與電腦連接：軟件升級和數(shù)據(jù)傳送，如實驗者可以通過電腦預(yù)先定義實驗設(shè)置；
- 可接駁96孔shuttle轉(zhuǎn)染儀

2、配套轉(zhuǎn)染試劑盒：

4D-Nucleofector細胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)采用導(dǎo)電性聚合物，取代了金屬鋁離子，保證高效轉(zhuǎn)染的同時獲得高的細胞存活率。

技術(shù)

的導(dǎo)電性聚合物電轉(zhuǎn)杯和電轉(zhuǎn)板條
-  的導(dǎo)電性聚合物材料替代傳統(tǒng)的金屬鋁離子電極
-  克服傳統(tǒng)金屬電極釋放的金屬離子（Al3+對細胞的毒性）對轉(zhuǎn)染效果的影響。
-  提高（或維持）轉(zhuǎn)染效率的同時，保證細胞的生理特性。
-  規(guī)格：單孔電轉(zhuǎn)杯（100μl）/16孔電轉(zhuǎn)板條（20μl）/24-孔浸入電極板(350 μl/孔)

品種：

  X功能單元核轉(zhuǎn)染試劑盒
-  3種細胞系轉(zhuǎn)染試劑盒：SE, SG, SF電轉(zhuǎn)液；
-  5種原代細胞轉(zhuǎn)染試劑盒：P1, P2, P3, P4, P5電轉(zhuǎn)液
-  2種優(yōu)化轉(zhuǎn)染試劑盒
Y功能單元原位貼壁核轉(zhuǎn)染試劑盒
-  原位貼壁核轉(zhuǎn)染試劑盒AD1：神經(jīng)元原位貼壁轉(zhuǎn)染；
-  原位貼壁核轉(zhuǎn)染試劑盒AD2

種類：

組成：
- 細胞特異性核轉(zhuǎn)染液
- 添加劑
- pmaxGFP陽性質(zhì)粒
- 單孔電轉(zhuǎn)杯（100μl）/16孔電轉(zhuǎn)板條（20μl）/24-孔浸入電極板(350 μl/孔)
- 塑料吸管（與單孔電轉(zhuǎn)杯配套）

規(guī)格：多種規(guī)格，如12RCT、24RCT、32RCT、64RCT、96RCT等

3、原位核轉(zhuǎn)染技術(shù)：“原位核轉(zhuǎn)染技術(shù)”突破了傳統(tǒng)電穿孔技術(shù)只能在細胞懸液中轉(zhuǎn)染的缺陷，實現(xiàn)了貼壁細胞在培養(yǎng)的不同階段中直接進行轉(zhuǎn)染的核轉(zhuǎn)染。
2010年，Lonza推出了4D系統(tǒng)，其中利用X unit的16孔電轉(zhuǎn)板條，推出了個原位核轉(zhuǎn)染試劑盒；
2010年，Lonza推出了適用于96孔shuttle系統(tǒng)的新原位轉(zhuǎn)染試劑盒——96孔電轉(zhuǎn)板條。
2011年，Lonza推出了Y unit，可以直接在24孔細胞培養(yǎng)板中進行原位核轉(zhuǎn)染。

“All-in-one” Process——細胞培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染、觀察和分析都在同一細胞培養(yǎng)板中或電轉(zhuǎn)板中實現(xiàn)。

分離后的原代神經(jīng)元直接接種到鋪有多聚賴氨酸的24孔培養(yǎng)板中或電轉(zhuǎn)板條中。神經(jīng)元細胞能貼壁培養(yǎng)多達14d，并在培養(yǎng)過程的任何時間點進行轉(zhuǎn)染或多次轉(zhuǎn)染。

優(yōu)勢：
–  可在神經(jīng)元貼壁生長的任何階段進行原位核轉(zhuǎn)染或多次進行原位核轉(zhuǎn)染
–  原位轉(zhuǎn)染前、中、后，神經(jīng)元都培養(yǎng)在24孔細胞培養(yǎng)板中，維持貼壁生長的生理狀態(tài)
–  轉(zhuǎn)染高可達70%的非病毒轉(zhuǎn)染方法
–  整個過程維持了細胞功能
–  適用于共聚焦顯微鏡下觀察和分析

 （1）、24孔細胞培養(yǎng)板中貼壁細胞的原位核轉(zhuǎn)染技術(shù)：4D細胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)-Y功能單元