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關(guān)于玻璃層析柱過柱的技巧您了解多少？
閱讀：3373 發(fā)布時(shí)間：2022-3-14
玻璃層析柱是一種廣泛使用的下游純化技術(shù)，可用于各種化合物。常見的目標(biāo)分子包括蛋白質(zhì)、肽和/或核酸。隨著更小基球、更高性能層析介質(zhì)的出現(xiàn)，行業(yè)已經(jīng)明確需要更高壓力的層析柱硬件，以在安全的層析柱配置中應(yīng)對(duì)更高背壓上樣。傳統(tǒng)上，這可通過不銹鋼硬件解決，但這不允許科學(xué)家看到層析柱的內(nèi)部。
玻璃層析柱過柱的技巧：
柱層析按過柱時(shí)的壓力可以分為：加壓，常壓，減壓。壓力可以增加淋洗劑的流動(dòng)速度，減少產(chǎn)品收集的時(shí)間，但是會(huì)減低柱子的塔板數(shù)。所以其他條件相同的時(shí)候，常壓柱是效率較高的，但是時(shí)間也最長(zhǎng)，例如一些天然化合物的分離，有時(shí)一個(gè)柱子過幾個(gè)月也有可能。
減壓柱能夠減少硅膠的使用量，但是由于大量的空氣通過硅膠會(huì)使溶劑揮發(fā)，有時(shí)會(huì)在柱子外面有水汽凝結(jié)，另外有些比較易分解的東西可能得不到，而且還必須同時(shí)使用水泵抽氣，噪音大，時(shí)間長(zhǎng)，所以減壓過柱用得比較少。
加壓過柱是一種比較好的方法，與常壓柱類似，但用外加壓力可以使淋洗劑走的快些。壓力的提供可以是壓縮空氣，雙連球或者小氣泵（用魚缸供氣的加壓泵就行）。特別是在容易分解的樣品的分離中很適用。
一般壓力不可過大，不然溶劑走的太快就會(huì)減低分離效果。因?yàn)榧訅哼^柱效率高，分離效果較好，所以加壓過柱在普通的有機(jī)化合物的分離中是非常適用的。
玻璃層析柱主要是根據(jù)要分離的植物有效成份、化工中間體、活性物質(zhì)等物質(zhì)與層析柱內(nèi)的不同填料（ODS填料、大孔樹脂、離子交換填料、分子篩填料、親和填料、凝膠填料，硅膠，纖維類等填料）：樣品在不同的親和度，在不同濃度的酸堿液下，在不同的極性溶液下，在不同的壓力和流速下有層次的分開不同類別或不同成份，而得到計(jì)劃有效組份或成分.。
該層析柱可以接蠕動(dòng)泵、也可以接AKTA儀器使用，簡(jiǎn)單方便、密封性好！