超低背景的簡單純化

Spot-Trap 是一種與樹脂基質(zhì)偶聯(lián)的高質(zhì)量Spot-Tag結(jié)合蛋白，設(shè)計(jì)用于免疫沉淀或親和純化方案。它只會與 Spot-Tag

融合蛋白上發(fā)現(xiàn)的新的 12 個(gè)氨基酸序列相互作用。與其他短肽“標(biāo)簽"系統(tǒng)相比，Spot-Tag 具有許多優(yōu)勢。與所有 Nanobody-Trap 一樣，Spot-Trap 結(jié)合蛋白是一種小的 (14.7 kDa)、單價(jià)、高親和力單克隆羊駝抗體（“納米抗體"），可很快識別 N表達(dá)的融合蛋白的-末端或C-末端。Spot-Trap 現(xiàn)在提供共價(jià)偶聯(lián)到 Particles M-270 或瓊脂糖或磁性瓊脂糖珠的表面用于快速有效的免疫沉淀和親和純化。它針對 Spot-Tagged 蛋白質(zhì)及其相互作用伙伴的生化分析進(jìn)行了優(yōu)化。它已經(jīng)過多種應(yīng)用測試，并在各種系統(tǒng)中有效工作，例如細(xì)菌、酵母、哺乳動物細(xì)胞系和昆蟲細(xì)胞。對于包括質(zhì)譜法和酶活性測量在內(nèi)的生化分析，可以使用 Spot-Trap 通過免疫沉淀快速有效地分離 Spot-Tag 融合蛋白及其相互作用因子。

M-270 顆粒專為大的融合蛋白和大型蛋白復(fù)合物而制造！
Spot-Trap M-270 顆粒專門設(shè)計(jì)用于捕獲對于我們的標(biāo)準(zhǔn) Spot-Trap 瓊脂糖或磁性瓊脂糖珠而言太大的融合蛋白。更大且尺寸更一致的 M-270 顆粒為大量的 Spot-fusion 蛋白在其表面結(jié)合提供了充足的空間。與其他 Spot-Trap 試劑一樣快速和清潔 — M-270 顆粒版本可對您的 Spot 融合蛋白及其相互作用因子進(jìn)行簡單的一步分離，因此您的實(shí)驗(yàn)室不會有任何損失。

M-270 顆粒是無孔的固體顆粒，配體偶聯(lián)在其表面上。出于這個(gè)原因，所有大小的 Spot-tagged 蛋白質(zhì)（包括非常大的 SPOT-tagged 蛋白質(zhì)）和多聚體都與 Spot-Trap M-270 顆粒結(jié)合。這種免疫純化試劑甚至適用于蛋白質(zhì)復(fù)合物，包括：i) 龐大的蛋白質(zhì)，以及 ii) 二級或三級伙伴。無論結(jié)合什么，珠子都可以在多種條件下有效地進(jìn)行免疫沉淀。

你實(shí)驗(yàn)室喜歡的味道是什么？
Nanobody-Trap 是與單價(jià)基質(zhì)（瓊脂糖珠、磁性顆粒和）偶聯(lián)的高質(zhì)量結(jié)合蛋白，用于對許多融合蛋白進(jìn)行生化分析

和他們的互動伙伴。不同的格式允許您進(jìn)行大量的實(shí)驗(yàn)。十分流行的形式是與瓊脂糖珠相連的納米抗體陷阱。瓊脂糖珠提

供大的結(jié)合能力和小的背景，同時(shí)仍然易于使用。如果自動化對您的實(shí)驗(yàn)室很重要，那么磁性瓊脂糖顆粒是一個(gè)不錯(cuò)的

選擇。對于巨大的融合蛋白（超過 150 kDa）或較大的蛋白質(zhì)組裝的一部分，選擇連接到 M-270 珠子的納米抗體陷阱。純

化的蛋白質(zhì)復(fù)合物與質(zhì)譜等廣泛的下游分析兼容。

當(dāng)結(jié)果很重要時(shí)，使用 Spot-Trap

在左側(cè)，對 Spot-Tagged GFP 進(jìn)行免疫沉淀。很明顯，Spot-Trap 不僅缺乏重鏈和輕鏈抗體污染，而且缺乏

污染蛋白的非特異性結(jié)合。這使得 Spot-Trap 成為一種出色的親和捕獲工具，用于單帶純化 Spot 標(biāo)記的蛋白

質(zhì)。在右側(cè)，相同的 Spot-Tagged GFP 與基質(zhì)結(jié)合，然后用 100 µM Spot-Peptide 競爭性洗脫。這種溫和的親和

純化技術(shù)是保存蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能以及觀察更大蛋白質(zhì)復(fù)合物的好的方法。

Spot-Trap 專為一塵不染的背景而設(shè)計(jì)

在右側(cè)，使用不存在 Spot-Tag 或任何其他表達(dá)的標(biāo)記蛋白的 HEK293T 細(xì)胞裂解物進(jìn)行免疫沉淀（每個(gè)泳道都標(biāo)準(zhǔn)化為相同的結(jié)合能力）。IP 是根據(jù)各自制造商的協(xié)議執(zhí)行的。兩種版本的 Spot-Trap 親和試劑幾乎沒有顯示出與內(nèi)源性哺乳動物細(xì)胞蛋白的非特異性結(jié)合，因?yàn)樗捎昧私?jīng)過重新設(shè)計(jì)的優(yōu)質(zhì)洗滌緩沖液。這保證每次都有干凈的結(jié)果！

駱駝科單域抗體就像類固醇上的 IgG

被稱為駱駝科的動物家族（駱駝、美洲駝和羊駝）產(chǎn)生沒有輕鏈的功能性抗體，即所謂的“重鏈"抗體。這些重鏈抗體通過單個(gè)可變結(jié)構(gòu)域識別并結(jié)合其抗原。當(dāng)從其羧基尾部切下時(shí)，這些桶狀結(jié)構(gòu) (2×3 nm) 非常小、天然存在且完整的抗原結(jié)合片段 (MW 為 13 kDa)。這些稱為納米抗體的片段具有高特異性、低納摩爾范圍內(nèi)的親和力和亞納摩爾范圍內(nèi)的解離常數(shù)（通常比小鼠 IgG 好 10 到 100 倍）的特點(diǎn)。納米抗體的緊湊尺寸使其在高達(dá) 70°C 的溫度下極為穩(wěn)定，即使在 2M NaCl 或 0.5% SDS 中也能發(fā)揮作用。這些小而強(qiáng)大的抗體片段可用于各種*的應(yīng)用。他們將打開您的研究可能性。