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產氣莢膜梭菌α毒素酶聯免疫分析試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中產氣莢膜梭菌α毒素水平。用純化的產氣莢膜梭菌α毒素抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入產氣莢膜梭菌α毒素，再與HRP標記的產氣莢膜梭菌α毒素抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的產氣莢膜梭菌α毒素呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中產氣莢膜梭菌α毒素濃度。

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