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液相色譜儀樣品的預(yù)處理和檢測

閱讀:1136        發(fā)布時(shí)間:2015-8-11

液相色譜儀樣品的預(yù)處理和檢測

1.  預(yù)處理:樣品來源形式不同,可能以如下形式出現(xiàn):       

可直接進(jìn)樣的溶液; 

b需稀釋、pH緩沖、加人內(nèi)標(biāo)或其它定容操作的溶液;       

c必須首先溶解或提取處理的固體;。 

d樣品需預(yù)處理以除去干擾物和或保護(hù)色譜柱或儀器不受損害。 

可直接進(jìn)樣的樣品有操作方便、精密度好的優(yōu)點(diǎn),然而大多數(shù)液相色譜儀分析的樣品需稱重或稀釋定容后才能進(jìn)樣。當(dāng)樣品溶劑成分接近于流動相時(shí),一般不會產(chǎn)生基線波動等問題,通常能夠得到較好的結(jié)果。有些樣品在注入HPLC前需進(jìn)行部分分離(預(yù)處理),以除去干擾物、濃縮樣品或消除“柱殺手",因此了解樣品和各種被測物的濃度范圍非常重要。 

2.  檢測:HPLC方法建立期間,在*次進(jìn)樣前,我們必須有把握所選擇的檢測器能檢測到所有的被測樣品組分。通常可變波長紫外(UV)檢測器,因這種檢測器使用方便,且可用于大多數(shù)樣品。UV光譜數(shù)據(jù)可從文獻(xiàn)中查找,也可通過所測樣品成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)估算,直接測得(如果可拿到化合物純品)或在HPLC分離期間用二極管陣列檢測器(PDA)得到。樣品對UV檢測響應(yīng)不足時(shí),可考慮使用其它類型檢測器(熒光,電化學(xué)等),或衍生化樣品使檢測信號增強(qiáng)。

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