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液相色譜儀分析前分離目的的確定

閱讀:861        發(fā)布時間:2015-9-8

  液相色譜儀分離的目的必須十分明確,下面的問題在建立方法之初就應確定:

  (1)主要目的是什么?定量或定性,還是定性、定量同時做?; 

  (2)是否有必要解析出樣品的所有成分?譬如可能有必要分離出產(chǎn)品中的所有降解

物或雜質,以使含量測定結果更加可靠,但卻沒必要將它們彼此*分開。 

  (3)如要求定量分析,準確度與精密度需多大?樣品主要成分的精密度通常能達到

±12%,特別是不需樣品預處理的情況。 

  (4)特殊化合物可能會以不同的樣品形式出現(xiàn)(如:原料藥,一種或多種形態(tài),環(huán)

保樣品等)。是否需要一種以上的HPLC方法?單一方法分離不同形態(tài)樣品是否理想?

  5)一次將分析多少樣品?當必須同時處理大量樣品時,運行時間將變得非常重要。

有時甚至為了縮短運行時間而以犧牲樣品分離度作代價,如縮短柱長或加快流速。當一次分析的樣品數(shù)目超過10個,運行時間一般應控制在20min以內(nèi)。

   (6)將要使用該方法的實驗室中,有哪些HPLC設備?色譜柱能否恒溫系統(tǒng)能否做梯度洗脫?該方法是否可在不同設計與生產(chǎn)的設備上運行?     

   方法建立實驗開始之前,應明確對方法的這些要求。

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