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脂溶性維生素樣品檢測(cè)方法對(duì)比
針對(duì)液相色譜儀的眾多優(yōu)點(diǎn),大多數(shù)文獻(xiàn)中都采用反相色譜法。它包括短鏈烷基(如C8)反相系統(tǒng)和長(zhǎng)鏈烷基(如C18)反相系統(tǒng)。其中C18柱應(yīng)用較為廣泛,綜合短鏈烷基鍵合和長(zhǎng)鏈烷基鍵合的眾多特征可得出使用C18柱對(duì)脂溶性維生素分離是一種較好的方法。脂溶性維生素常用的檢測(cè)方法有液相色譜與紫外檢測(cè)器(包括二級(jí)管陣列檢測(cè)器DAD)、熒光檢測(cè)器、電化學(xué)檢測(cè)器。
液相色譜-紫外檢測(cè)器聯(lián)用(LC-UV) UV是液相色譜中應(yīng)用zui廣泛的一種檢測(cè)器,其靈敏度較高、噪音低、線形范圍寬,對(duì)流速和溫度的波動(dòng)不靈敏,適用于制備色譜。由于可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器可選擇的波長(zhǎng)范圍很大,即能提高檢測(cè)器的選擇性,又可選用組分的zui靈敏吸收波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)定,從而提高了檢測(cè)的靈敏度。因此,用LC-UV測(cè)定脂溶性維生素,可以隨意選擇吸收波長(zhǎng)的范圍,提高了工作人員的工作效率。
液相色譜-熒光檢測(cè)器聯(lián)用(LC=FD) FD是一種具有高靈敏度和高選擇性的檢測(cè)器,FD的靈敏度比紫外吸收檢測(cè)器高100倍,對(duì)痕量組分檢測(cè)時(shí),是一種的檢測(cè)工具。但其線性范圍較窄,測(cè)定中不可使用能熄滅、抑制或吸收熒光的溶劑做流動(dòng)相,對(duì)不能直接產(chǎn)生熒光的物質(zhì),要使用色譜柱后衍生技術(shù),操作比較復(fù)雜。所以,在測(cè)定脂溶性維生素時(shí),UV比FD測(cè)定更快速。
液相色譜-電化學(xué)檢測(cè)器聯(lián)用(LC-ECD) EDC的靈敏度很高,應(yīng)用范圍廣,尤其適合于痕量組分的分析。凡具有氧化還原活性的物質(zhì)都能進(jìn)行檢測(cè),不具有氧化還原活性的化合物必須進(jìn)行衍生化后,方可進(jìn)行電化學(xué)檢測(cè)。一般在使用ECD注意流動(dòng)相必須能導(dǎo)電;流動(dòng)相必須連續(xù)不斷地除氣;選適當(dāng)?shù)耐饧与娢?/span>,提高檢測(cè)器的選擇性和穩(wěn)定性;流速和溫度需十分穩(wěn)定。雖然國(guó)內(nèi)、外有ECD測(cè)定脂溶性維生素的相關(guān)報(bào)道,但ECD干擾因素較多,操作起來(lái)比UV復(fù)雜,影響工作效率。
綜上所述,結(jié)合LC-UV的可行性,利用LC-UV檢測(cè)脂溶性維生素應(yīng)是。