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液相色譜分析中峰位置改變的原因與解決辦法
閱讀：4857 發(fā)布時(shí)間：2015-9-15
液相色譜分析中峰位置的改變是保留時(shí)間改變的特殊情況。但是峰位置的變化比色譜圖中每個(gè)峰的保留時(shí)間增加或減少更為嚴(yán)重。因?yàn)楸Ａ魰r(shí)間的改變，可用改變流動(dòng)相的強(qiáng)度或改變流速保持原來(lái)的水平，如果色譜圖中峰位順序發(fā)生變化，或是原先分開(kāi)的峰又交叉在一起，無(wú)論采用什么方法處理都不那么簡(jiǎn)單。引起峰位順序的變化可能有以下兩種原因。
1 柱退化
同一根柱因鍵合相的組成發(fā)生了變化（化學(xué)垃圾或鍵合相損失），導(dǎo)致峰位置的改變。
2 柱-柱間的變化
發(fā)了峰位置的改變，首先檢查分離條件有無(wú)差錯(cuò)（流動(dòng)相、溫度、柱等），一旦確認(rèn)了分離條件是正確的，可能面臨更困難的問(wèn)題，直至需要重新建立色譜方法。
在初建色譜方法時(shí)就能預(yù)測(cè)到峰的位置。通常要系統(tǒng)地改變條件，使所有的組分的峰在色譜圖內(nèi)處于位置。如反相分離電離組分時(shí)，可改變?nèi)軇?，也可改?/span>pH值或緩沖液濃度，或加改良劑。改變這些條件時(shí)可以注意到峰位置的變化。
在試驗(yàn)的過(guò)程中要謹(jǐn)慎行事，只要恢復(fù)到可接受的峰位就可。特別在多組分的分離中，如氨基酸的分析，要有合適的分離條件使所有的峰都有確定的位置，稍有不慎，某些組分就會(huì)分不開(kāi)。所幸的是只要做一些條件的變化，就可能找到的位置。