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尿中兒茶酚胺代謝產(chǎn)物含量檢測(cè)法在神經(jīng)母細(xì)胞瘤早期診斷中的價(jià)值

閱讀:1058        發(fā)布時(shí)間:2016-1-6

  小兒神經(jīng)母細(xì)胞瘤(NB)是目前威脅兒童生命的主要腫瘤之一,發(fā)病率約占全部惡性腫瘤患兒的7%,而病死率卻占其15%,僅次于白血病。目前NB診斷方法有B超定位、香草扁桃酸(VMA)層析法、骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)、病理及單克隆抗體檢測(cè)等。B超定位能發(fā)現(xiàn)腫瘤的部位、大小,但腫瘤小于2cm時(shí)不易發(fā)現(xiàn)。骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查只能對(duì)有骨髓轉(zhuǎn)移的NB患兒作出診斷,單克隆抗體是檢測(cè)患兒血液、骨髓或病理活體組織的一種免疫方法,難以早期診斷NB

  利用HPLC法測(cè)定隨機(jī)尿中VMA、HVA的含量,以尿中肌酐(Cr)量標(biāo)化標(biāo)本中的VMA、HVA濃度,表示VMAHVA的含量,探討其在NB早期診斷及篩查中的意義。

  測(cè)定方法:取被測(cè)尿液離心(3000r/min,5min),其上清經(jīng)孔徑0.22µm濾膜加壓過(guò)濾。濾液用0.01mol/L鹽酸10倍稀釋,并加入DHBA4.0µ mol/L。尿稀釋液20µL注入液相色譜儀中,用流動(dòng)相洗脫,電化學(xué)檢測(cè)器檢測(cè)。取尿樣100µL,用比色法在全自動(dòng)生化分析儀上測(cè)定尿Cr量。采用標(biāo)準(zhǔn)品保留時(shí)間及樣品加標(biāo)準(zhǔn)品相結(jié)合的方法做為定性指標(biāo)。每日試驗(yàn)時(shí),分別取不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液(VMA2.50、1.25、0.625µmol/L,HVA5.00、2.501.25µmol/L,DHBA4.0µmol/L20µL進(jìn)行HPLC分析。用內(nèi)標(biāo)法,以峰面積計(jì)算被檢尿液中VMA、HVA濃度,再用尿Cr含量予以標(biāo)化尿中VMA、HVA濃度。

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