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為什么CCK8鏡下趨勢是對的,測出來的OD值卻不對??

閱讀:1715      發(fā)布時(shí)間:2024-9-27
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CCK-8實(shí)驗(yàn)中,鏡下趨勢正確但測出的OD值不準(zhǔn)確的問題可能由多種原因?qū)е隆?/span>那么影響CCK8結(jié)果的因素到底有哪些?

一、細(xì)胞接種數(shù)量過多

首先,細(xì)胞接種數(shù)量過多可能導(dǎo)致OD值過高。當(dāng)細(xì)胞數(shù)量過多時(shí),它們可能會(huì)重疊生長,導(dǎo)致測得的OD值偏高。此外,如果細(xì)胞密度過高,可能會(huì)影響藥物的均勻分布,從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果?。

二、藥物作用時(shí)間不足或鋪板細(xì)胞密度太大

其次,藥物作用時(shí)間不足或鋪板細(xì)胞密度太大也可能導(dǎo)致測量不準(zhǔn)確都可能影響到細(xì)胞的生長狀態(tài)和最終測得的OD?。

三、誤差

操作過程中的誤差也是導(dǎo)致OD值不準(zhǔn)確的一個(gè)原因。例如,加入CCK-8之前,如果在更換培養(yǎng)基時(shí)不小心吸走了活細(xì)胞,或者操作不當(dāng)導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)改變,都可能影響到最終的OD值測量?。

四、注意事項(xiàng)

此外,培養(yǎng)板最外一圈的孔容易干燥揮發(fā),這可能導(dǎo)致體積不準(zhǔn)確,從而增加誤差。因此,最外一圈的孔通常不作為測定孔使用?。

最后,CCK-8沾在壁上也可能產(chǎn)生誤差。為了避免這種情況,建議在加入CCK-8后輕輕敲擊培養(yǎng)板以幫助混勻?

綜上所述,要獲得準(zhǔn)確的CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果,需要注意細(xì)胞接種密度、藥物作用時(shí)間、操作過程中的細(xì)節(jié)以及培養(yǎng)條件等因素

五、推薦

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