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IHC染色不均勻分析

閱讀:409      發(fā)布時(shí)間:2024-11-22
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上次我們分享了IHC未染色或無(wú)信號(hào)的原因分析,這次讓我們來(lái)看看IHC染色不均勻是為什么吧。

一、組織切片制備

解釋組織切片薄厚不均勻

建議更換刀片

二、組織固定

1.解釋酒精固定不足會(huì)產(chǎn)生偽影;

建議延長(zhǎng)固定時(shí)間;嘗試不同的固定液

2.解釋固定延遲導(dǎo)致抗原擴(kuò)散;

建議立即固定組織可以考慮使用交聯(lián)固定劑

image.png

三、脫蠟

解釋脫蠟不wan

建議使用新鮮的二甲苯

四、抗體兼容性

解釋一抗可能結(jié)合其他抗原上的表位

建議從多抗切換至單抗;嘗試不同的單抗

五、透化

解釋細(xì)胞膜被破壞,膜蛋白丟失

建議使用低濃度或更溫和(Tween-20)的透化試劑

六、組織切片狀態(tài)

解釋組織切片未保持濕潤(rùn)

建議在染色階段避免組織切片干燥

 

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