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化學轉(zhuǎn)染分類及介紹

閱讀:322      發(fā)布時間:2025-3-24
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標題:化學轉(zhuǎn)染分類及介紹

一、轉(zhuǎn)染

轉(zhuǎn)染(transfection)是細胞在一定條件下主動或被動導入外源DNA片段而獲得新的表型的過程。

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二、化學轉(zhuǎn)染

1.陽離子脂質(zhì)體

【原理】帶正電荷的脂質(zhì)體(由磷脂、膽固醇等組成的具有脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu))依靠靜電作用與DNA形成DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物,通過細胞的內(nèi)吞作用進入細胞.

【優(yōu)點】操作簡便

適合轉(zhuǎn)染各種細胞

DNA濃度有一定要求

重復(fù)性好,但轉(zhuǎn)染時需除血清

【缺點】需進行條件優(yōu)化(一些細胞對陽離子脂質(zhì)體較敏感)

有些細胞系不容易轉(zhuǎn)染

血清的存在干擾復(fù)合物的形成,導致低轉(zhuǎn)染效率

2.陽離子聚合物(如聚乙烯亞胺(PEI))

【原理】帶正電的聚合物與DNA形成帶正電的復(fù)合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用,并通過內(nèi)吞作用進入細胞

【優(yōu)點】不含疏水部分而wan-quan溶于水

可進行化學修飾

不像脂質(zhì)體一樣破壞細胞結(jié)構(gòu)

濃縮DNA,將DNA運送到細胞內(nèi),并其在細胞核內(nèi)釋放

細胞毒性很低,高效

不被血清清除

【缺點】不能生物降解(樹枝狀大分子)

只限于瞬時轉(zhuǎn)染

3.磷酸鈣法

【原理】磷酸鈣能夠促進外源DNA和細胞的結(jié)合,磷酸鈣-DNA復(fù)合物能夠附著到細胞表面,并通過內(nèi)吞作用進入細胞

【優(yōu)點】操作簡單

DNA濃度要求高

【缺點】對pH值敏感,需仔細制備試劑

適用性有局限(不適用于原代細胞和懸浮細胞)

不能采用RPMI培養(yǎng)基(含有高濃度的磷酸鹽)

三、Polyplus轉(zhuǎn)染試劑

Polyplus代理——天津益元利康生物科技有限公司,歡迎咨詢!?。?/span>

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天津益源利康生物科技有限公司可提供各種細胞、抗體、蛋白、試劑盒、耗材等,歡迎咨詢。

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