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英諾思EasyIso™ 人類CD8 T細胞分離試劑盒操作步驟

閱讀:244      發(fā)布時間:2025-5-12
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引言
CD8 T細胞在免疫應(yīng)答中扮演核心角色,其分離純度直接影響下游實驗的可靠性。然而,傳統(tǒng)分離方法常面臨操作復(fù)雜、細胞活性受損等問題。英諾思推出的EasyIso™ 人類CD8 T細胞分離試劑盒(貨號SN3103),通過創(chuàng)新的無柱磁極分離技術(shù),實現(xiàn)高純度、快速且溫和的CD8 T細胞分選,為科研與臨床研究提供高效工具。上期介紹了原理《
英諾思EasyIso™ 人類CD8 T細胞分離試劑盒(SN3103)實驗原理》,這期介紹一下操作步驟。

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一、操作步驟:快速四步法

1. 樣本制備:將PBMC單細胞懸液濃度調(diào)整至1×10? cells/mL;

2. 抗體孵育:按100 μL/mL加入EasyIso™ Human CD8 T Cell Isolation Cocktail,常溫孵育10分鐘

3. 磁珠結(jié)合:加入鏈霉親和素納米磁珠(100 μL/mL),輕柔混勻后孵育5分鐘;

4. 磁極分離:

使用磁力架吸附3-5分鐘(單孔/聯(lián)排架);

傾斜磁力架,將富含CD8 T細胞的上清轉(zhuǎn)移至新管中,即可獲得高純度細胞。

全程僅需20分鐘,顯著提升實驗效率。

二、關(guān)鍵試劑與設(shè)備要求

緩沖液:推薦使用FACS Buffer1×PBS + 0.02% EDTA + 2% FBS),提高細胞得率;

耗材:70 μm無菌濾網(wǎng)、無菌離心管;

儀器:離心機、磁力架(兼容單孔或聯(lián)排管)。

三、使用建議與注意事項

PBMC制備:推薦采用淋巴細胞分離液進行密度梯度離心,避免紅細胞裂解法;

無菌操作:全程需在超凈臺中進行,防止污染;

滲透壓穩(wěn)定:確保FACS Buffer配制準(zhǔn)確,保護敏感免疫細胞;

磁珠處理:使用前充分震蕩混勻磁珠30秒,確保結(jié)合效率。

四、數(shù)據(jù)驗證:純度高達91.2%

實驗數(shù)據(jù)顯示,使用SN3103試劑盒分選后:

分選前:PBMCCD8+ T細胞占比14.3%;

分選后:CD3+CD8+ T細胞純度提升至91.2%(圖B),滿足高標(biāo)準(zhǔn)實驗需求。

聯(lián)系英諾思生物代理——天津益元利康生物科技有限公司立即訂購SN3103,體驗高效細胞分選技術(shù)!

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