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中級(jí)會(huì)員 | 第4年

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PCR和qPCR的區(qū)別

時(shí)間:2024/4/22閱讀:833
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 PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))和qPCR(定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))是分子生物學(xué)中兩種常用的DNA擴(kuò)增技術(shù),它們?cè)谠砩舷嗨?,但在目的和結(jié)果分析上有所不同。


PCR是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于在體外快速擴(kuò)增大量特定的DNA片段。它通過溫度循環(huán)來實(shí)現(xiàn)DNA的變性、退火和延伸三個(gè)基本步驟,使目標(biāo)DNA片段呈指數(shù)級(jí)增長(zhǎng)。PCR通常用于克隆、基因鑒定和DNA指紋等應(yīng)用。


qPCR是PCR的一種改進(jìn)版本,它不僅能夠擴(kuò)增DNA,而且能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)擴(kuò)增過程。qPCR通過使用熒光染料或熒光標(biāo)記探針,隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,熒光信號(hào)的強(qiáng)度會(huì)隨著DNA的合成而增加。這種熒光信號(hào)的變化可以被檢測(cè)器實(shí)時(shí)記錄,從而可以定量地監(jiān)測(cè)特定DNA序列的初始含量。qPCR常用于基因表達(dá)水平的分析、病原體檢測(cè)和遺傳變異分析等。


總結(jié)來說,PCR和qPCR的主要區(qū)別在于qPCR能夠提供定量數(shù)據(jù),而PCR只能提供定性信息。qPCR通過實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)的變化,可以準(zhǔn)確地測(cè)量樣本中目標(biāo)DNA的起始數(shù)量,而PCR則需要通過后續(xù)的電泳等方法來分離和檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物。


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