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Sulfo-Cy3 maleimide,水溶CY3-馬來(lái)酰亞胺的描述

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Sulfo-Cy3 maleimide,水溶CY3-馬來(lái)酰亞胺

外觀 :

紅色粉末

CAS號(hào) :

1656990-68-9

分子式 :

C36H41KN4O9S2

分子量 :

776.96

ex/em :

550/566 nm (PBS緩沖液)

消光系數(shù)(ε) :

162000 L?mol?1?cm?1

量子產(chǎn)率(Φ) :

0.1

溶解性 :

易溶于甲醇,DMF等有機(jī)溶劑,*易溶于水

保存條件 :

避光,干燥,-20oC保存

運(yùn)輸條件 :

室溫

結(jié)構(gòu)式:

image.png 

磺化Cy3是Cy3(Cyanine 3)的水溶型。它的光譜性質(zhì)和Cy3類似,在熒光顯微鏡下發(fā)橘黃色熒光。它的熒光很亮,并且對(duì)pH不敏感,一般可以用530nm-561nm的激光束激發(fā)然后用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的濾片觀察,所以在絕大部分熒光儀器上都可以使用。標(biāo)記后,樣品背景熒光一般認(rèn)為比TAMRA等系列的染料低。 磺化Cy3可以用來(lái)標(biāo)記蛋白,抗體,多肽,核酸等各種生物分子。

馬來(lái)酰亞胺(maleimide)是生物標(biāo)記反應(yīng)中常用的基團(tuán),它可以和巰基(-SH)通過(guò)親和加成反應(yīng)生成穩(wěn)定的巰醚(thioester)結(jié)構(gòu)從而實(shí)現(xiàn)標(biāo)記。盡管胺基(比如賴氨酸精氨酸側(cè)鏈)也有親和性,但在中性或微酸性緩沖液中,馬來(lái)酰亞胺選擇性標(biāo)記巰基(反應(yīng)速度比胺基快>1000倍)。標(biāo)記反應(yīng)反應(yīng)迅速,選擇性高,產(chǎn)率好,另外,巰基是一種在生物分子中廣泛存在的官能團(tuán),比如蛋白中的半胱氨酸(cysteine)和雙硫鍵等,因此馬來(lái)酰亞胺/巰基(maleimide/thiol)標(biāo)記已成為僅次于NHS/胺基標(biāo)記的常用生物連接反應(yīng)(bioconjugation)。

磺化Cy3-馬來(lái)酰亞胺的水溶性*高,所以在標(biāo)記反應(yīng)中不需要使用有機(jī)共溶劑,特別適合標(biāo)記對(duì)有機(jī)溶劑敏感的生物分子。另外磺化Cy3水溶性*好,并且染料分子本身帶電荷,標(biāo)記到生物分子表面后不會(huì)引發(fā)疏水性聚集,提高熒光標(biāo)記產(chǎn)物的穩(wěn)定性。磺化Cy3-馬來(lái)酰亞胺也溶于甲醇,DMSO,DMF等有機(jī)溶劑,標(biāo)記反應(yīng)也可以在純有機(jī)溶劑中進(jìn)行

磺化Cy3-馬來(lái)酰亞胺標(biāo)記后的產(chǎn)物Ex/Em是550/566nm。

注意事項(xiàng)

· 磺化Cy3水溶性高,*性強(qiáng),如需脂溶性標(biāo)記染料,請(qǐng)選擇普通Cy3-馬來(lái)酰亞胺。

· 天然生物分子中巰基一般于氧化狀態(tài)(如雙硫鍵)存在,在馬來(lái)酰亞胺標(biāo)記前,務(wù)還原劑(如DTT,TCEP)活化巰基并除去多余還原劑。

· 馬來(lái)酰亞胺也可以和疊氮化合物反應(yīng),應(yīng)避免疊氮官能團(tuán)。

· 標(biāo)記反應(yīng)不要放在強(qiáng)光下,因?yàn)榇蟛糠譄晒饣衔镌趶?qiáng)光下長(zhǎng)時(shí)間照射會(huì)緩慢光漂泊(photobleaching)。

熒光光譜:

image.png 

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