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ClinoStar細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中細(xì)胞傳代的原理、方法和注意事項等介紹

閱讀:1070      發(fā)布時間:2024-1-15
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   ClinoStar細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)技術(shù)是現(xiàn)代生物學(xué)研究的重要手段,其中細(xì)胞傳代是細(xì)胞培養(yǎng)過程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
  一、原理
  細(xì)胞傳代是在細(xì)胞生長達(dá)到一定密度后,通過一定的方法將細(xì)胞從原培養(yǎng)體系中分離出來,并進(jìn)行再次培養(yǎng)的過程。其原理基于細(xì)胞的貼壁生長特性,即細(xì)胞在培養(yǎng)容器壁上生長,隨著時間的推移,細(xì)胞數(shù)量增加,密度增大,會因營養(yǎng)物質(zhì)耗盡和代謝產(chǎn)物積累而停止生長。為了使細(xì)胞持續(xù)生長,需進(jìn)行傳代。
 
  二、方法
  消化法:在培養(yǎng)液中加入適量的酶(如胰蛋白酶),使細(xì)胞與培養(yǎng)容器壁分離,形成懸浮狀態(tài)。然后通過離心、過濾等方法將細(xì)胞收集起來,再進(jìn)行二次培養(yǎng)。
 
  刮除法:使用玻璃或塑料刮子將附著在培養(yǎng)容器壁上的細(xì)胞刮下來。此方法適用于貼壁不強(qiáng)的細(xì)胞。
 
  酶-機(jī)械法:先在培養(yǎng)液中加入適量的酶,使細(xì)胞與培養(yǎng)容器壁部分分離,然后使用機(jī)械力量(如吸管或刮子)將細(xì)胞從培養(yǎng)容器壁上分離下來。
 ClinoStar細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)
  三、ClinoStar細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的注意事項
  操作前準(zhǔn)備:確保操作環(huán)境無菌,所有器具均已消毒。同時要保證細(xì)胞的遺傳背景清楚,以便于操作過程中進(jìn)行細(xì)胞的辨識和選擇。
 
  時間掌握:傳代時間不宜過長,以免影響細(xì)胞活性。通常在細(xì)胞密度較高時進(jìn)行傳代,此時細(xì)胞活力較強(qiáng),生長速度快。
 
  酶的濃度與作用時間:胰蛋白酶等酶的濃度要適中,作用時間不宜過長,以免對細(xì)胞造成損傷。
 
  溫度控制:整個操作過程應(yīng)在恒溫條件下進(jìn)行,以保持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。
 
  防止污染:操作過程中要嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程,避免細(xì)菌、真菌、支原體等微生物的污染。同時要定期對培養(yǎng)環(huán)境和器具進(jìn)行消毒。

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