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在進行低氧或高氧培養(yǎng)時,如何確保細胞的存活率和生長效率?

時間:2024/9/18閱讀:485
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在進行低氧或高氧培養(yǎng)時,確保細胞的存活率和生長效率需要考慮以下幾個關鍵因素:

 

1. 精確控制氣體濃度:使用三氣培養(yǎng)箱可以精確控制氧氣和二氧化碳的濃度。例如,Thermo Scientific 的 HERAcell 三氣培養(yǎng)箱能夠提供接近機體內(nèi)環(huán)境的培養(yǎng)條件,專為優(yōu)化哺乳動物細胞生長設計,能夠提供完善的低氧環(huán)境,以實現(xiàn)細胞更快、更健康地生長 。

 

2. 細胞類型和培養(yǎng)階段:不同的細胞類型對氧氣和二氧化碳的濃度有不同的需求。例如,某些細胞在低氧條件下(如1%-5% O2)可能表現(xiàn)出更好的生長和分化,而其他細胞可能需要更高的氧氣濃度。在培養(yǎng)的不同階段,細胞對氣體的需求也可能發(fā)生變化。

 

3. 溫度和pH值:維持適宜的溫度和pH值對細胞存活和生長至關重要。大多數(shù)細胞培養(yǎng)需要在36°C至37°C的溫度下進行,且pH值通常維持在7.4左右。使用基于CO2-碳酸氫鹽的緩沖液緩沖的培養(yǎng)基時,需要使用外源性CO2來維持pH值 。

 

4. 避免污染:細胞培養(yǎng)過程中要嚴格無菌操作,避免細菌、真菌或支原體的污染,這些都會對細胞的存活率和生長效率產(chǎn)生負面影響。

 

5. 營養(yǎng)物質(zhì)和血清:培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)和血清對細胞的生長和存活至關重要。需要確保培養(yǎng)基中的成分新鮮且未被破壞,且血清的質(zhì)量良好。

 

6. 細胞密度和傳代:細胞接種的密度和傳代的頻率也會影響細胞的生長。過高的細胞密度或過于頻繁的傳代可能導致細胞應激和生長減緩。

 

7. 監(jiān)測和調(diào)整:定期監(jiān)測細胞的生長狀態(tài)和培養(yǎng)條件,及時調(diào)整氣體濃度、更換培養(yǎng)基和進行必要的操作,以確保細胞的最佳生長環(huán)境。

 

通過上述措施,可以在低氧或高氧培養(yǎng)條件下優(yōu)化細胞的存活率和生長效率。

 


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