目錄:柏萊源（天津）生物科技有限公司>>生物試劑>>試劑盒kit>> HG-VE001Vero殘留DNA檢測試劑盒
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100 Reactions |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
貨號：HG-VE001
產(chǎn)品簡介：
Vero 殘留 DNA 檢測試劑盒是用于定量檢測各種生物制品的中間品、半成品和成品中 Vero 宿主細(xì)胞 DNA 殘留量的專用試劑盒。本試劑盒利用 TaqMan 熒光探針原理，定量檢測樣本中 Vero 殘留 DNA。檢測快速，專一性強(qiáng)，性能可靠，最-低檢測限可以達(dá)到 fg 水平。
試劑盒配套的 Vero DNA 定量參考品，已溯源至國家標(biāo)準(zhǔn)品。
本試劑盒的檢測范圍為:3fg/uL~3x105fg/uL。
100 Reactions
| 組分裝量 | 裝量 | 儲存條件 |
| 2×qPCR Reaction MIX | 1.6mL×1管 | -20℃及以下避光保存 |
| Vero Primer&Probe MIX | 550μL×1管 | |
| 定量參考品1(3×10?fg/μL) | 300μL×1管 | |
| 定量參考品2(3×10?fg/μL) | 300μL×1管 | |
| 定量參考品3(3×103fg/μL) | 300μL×1管 | |
| 定量參考品4(3×102fg/μL) | 300μL×1管 | |
| 定量參考品5(3×101fg/μL) | 300μL×1管 | |
| 定量參考品6(3fg/μL) | 300μL×1管 | |
| DNA稀釋液 | 1mL×3管 |
規(guī)定儲存條件下 12 個月。
◆ ABl QuantStudio 3 qPCR 儀
◆ 羅氏LC96 Real-Time PCR System
◆ AB1 7500 Real-Time PCR System
◆ 伯樂 CFX Opus96 Real-Time PCR System
◆ 鯤鵬ArchimedTM X Real-Time PCR System
◆熒光定量 PCR 儀
◆ 1000uL，100uL，10uL移液槍
◆ 1.5mL 無菌離心管
◆ 1000μL，100uL，10μL無菌低吸附帶濾芯吸頭
◆ 無菌無酶八聯(lián)管或 96 孔 qPCR 板
1、根據(jù)所需檢測的標(biāo)準(zhǔn)樣品和待測樣品數(shù)量(一般做3 組復(fù)孔)，計算反應(yīng)所需孔數(shù):
反應(yīng)孔數(shù)=(6 組參考品+1個無模板對照 NTC+待測樣品)x3
2、根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計算本次所需的 Vero qPCR MIX 總量:
Vero qPCRMIX=(反應(yīng)孔數(shù)+2或3)x20uL(2 或3為操作損失量)
3、將所用試劑置于冰上融化，輕微振蕩混勻，按下表所示配制Vero qPCR MIX：
| 組分 | 單孔反應(yīng)(μL) |
| 2 x qPCR Reaction MIX | 15 |
| Vero Primer & Probe MlX | 5 |
4.將所需試劑置于冰上融化，輕微振蕩混勻，按下表所示加樣(總體積 30uL):
| 模板 | 模板量 | 所需qPCR MIX量 |
| 參考品 | 參考品1-6各10μL | 20μL |
| 無模板對照NTC | DNA稀釋液各10μL | 20μL |
| 待測樣品 | 待測樣品各10μL | 20μL |
以 BIO-RAD 公司 CFX96 qPCR 儀為例。
1、設(shè)置反應(yīng)程序:
2、創(chuàng)建實驗反應(yīng)板，點擊 Select Fluorophores 選擇熒光 FAM;在反應(yīng)板圖表中，選擇樣品孔，在 Sample Type 中下拉選擇 Unknow，勾選熒光 FAM，Target Name 命名為 Vero;輸入每個樣品的重復(fù)次數(shù)及 Sample Name。
在反應(yīng)板圖表中，選擇標(biāo)曲孔，在 Sample Type 中下拉選擇 Standard，勾選熒光 FAM，Target Name 命名為 Vero;輸入每個稀釋梯度的重復(fù)次數(shù)及SampleName。并且分別在STD1，STD2，STD3，STD4，STD5，STD6的Concentration 一欄賦值為 300000、30000、3000、300、30、3(單位為fg/uL)。
3、點擊 Run 界面的“Start Run"按鈕進(jìn)行 PCR 測定。
| Stage1 | 污染消化 | Reps:1 | 50℃ | 2min |
| Stage2 | 預(yù)變性 | Reps:1 | 95℃ | 20s |
| Stage3 | 循環(huán)反應(yīng) | Reps:40 | 95℃ | 3s |
| 60℃ | 30s |
程序 Stage3 中 60°C 30s處設(shè)置為熒光收集
以BIO-RAD公司CFX96 qPCR儀為例
1. 點擊資料分析視窗Quantitation，可讀取標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率（Slope）、截距（Intercept）、擴(kuò)增效率（Effect）、R2。
2. 在視窗Quantitation Data 中，SQ Mean 一欄可讀取無模板對照NTC、NCS、待測樣本的檢測值，單位為fg/μL。
3. 陰性對照 NTC和 NCS 的 CT值都應(yīng)大于標(biāo)曲最-低濃度的 CT值或根據(jù)實驗室自身驗證結(jié)果設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)。
1. 本試劑盒已通過穩(wěn)定性（凍融等因素）的驗證，無需分裝。
2. 陰性樣品和陽性樣品（參考品和待測樣品等）的配制環(huán)境需區(qū)分區(qū)域，不可在一個區(qū)域內(nèi)操作，配制人員需穿戴整齊，戴好口罩、手套和穿好潔凈服。
3. 注意在不同加樣步驟間及時更換吸頭，避免交叉污染，避免長時開蓋。
4. 試劑盒必須在有效期內(nèi)使用。
5. 試劑盒內(nèi)所有組分建議在低溫環(huán)境融化后使用。
6. 只有嚴(yán)格遵守說明書的操作方法，全部使用本試劑盒配套的試劑才能保證優(yōu)良檢測效果。
7. 盡量在當(dāng)天完成樣本前處理純化后立即進(jìn)行后續(xù)qPCR檢測，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
8. 最終的試驗結(jié)果與試劑的有效性、操作者的操作方法及試驗環(huán)境密切相關(guān)。
9. 公司只對試劑盒本身負(fù)責(zé)，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé)，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預(yù)留充足的樣本。
10. 本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷。
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柏萊源（天津）生物科技有限公司的優(yōu)勢：
現(xiàn)貨供應(yīng)：公司庫存充足，可快速發(fā)貨，減少用戶等待時間。
效期保障：嚴(yán)格把控產(chǎn)品質(zhì)量，確保試劑效期新鮮，保障實驗結(jié)果的可靠性。
專業(yè)技術(shù)支持：提供詳細(xì)的實驗方案和技術(shù)指導(dǎo)，幫助用戶優(yōu)化實驗條件，提高實驗成功率。
定制化服務(wù)：根據(jù)用戶需求，提供個性化的產(chǎn)品和服務(wù)解決方案。
售后保障：完善的售后服務(wù)體系，及時解決用戶在使用過程中遇到的問題。
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