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一、半固體培養(yǎng)基(DMEM高糖)描述：

該培養(yǎng)基含有HAT,胎牛血清，HybridomaFeeder添加因子，細(xì)胞用抗生素，甲基纖維素，由DMEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基配制而成?？稍谌诤虾笸瓿呻s交瘤細(xì)胞篩選和亞克隆過程。相比液體培養(yǎng)方法，可以減少非目標(biāo)融合細(xì)胞過度生長導(dǎo)致的分泌抗體細(xì)胞的丟失。雜交瘤細(xì)胞在半固體培養(yǎng)基中形成肉眼可見的細(xì)胞群落后可以用機(jī)器或手工挑取細(xì)胞用于擴(kuò)大培養(yǎng)。該半固體培養(yǎng)基可用于大鼠，小鼠等雜交瘤細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。

二、半固體培養(yǎng)基(DMEM高糖)使用方法：

1、將90~100ml（用于1~2只小鼠融合）半固體培養(yǎng)基恢復(fù)到室溫或在細(xì)胞培養(yǎng)箱中平衡。

2、將融合后的細(xì)胞離心1500RPM,10min去除PEG或融合緩沖液，用10ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基將細(xì)胞重懸后加入到半固體培養(yǎng)基中混勻（也可以用轉(zhuǎn)子溫和混勻5min）。

3、將混勻后的半固體培養(yǎng)基鋪到50mm的平皿中，5ml/皿左右培養(yǎng)14天左右可見細(xì)胞群落。