細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)用5%CO2濃度的意義
為什么要用5%的CO2呢?
因?yàn)榧?xì)胞培養(yǎng)箱的中氣體環(huán)境是95%的空氣和5%的CO2。CO2既是細(xì)胞代謝產(chǎn)物,也是細(xì)胞所需成分,它主要與維持培養(yǎng)液的pH有直接關(guān)系。動(dòng)物細(xì)胞多數(shù)需要微堿性環(huán)境,pH為7.2~7.4,以不超出6.8~7.6為宜。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,隨著CO2釋放量的增多,培養(yǎng)基會(huì)變酸,因此常加入NaHCO3(與CO2溶于水后所形成的H2CO3構(gòu)成一個(gè)緩沖對(duì))來(lái)調(diào)節(jié)pH。NaHCO3具有釋放CO2的傾向,加入CO2可以抑制這個(gè)反應(yīng)的進(jìn)行。培養(yǎng)箱中CO2濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中NaHCO3濃度相平衡,如果培養(yǎng)箱中CO2濃度設(shè)定在5%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量應(yīng)為1.97 g/L;如果CO2濃度維持在10%,則NaHCO3的加入量應(yīng)為3.95 g/L。