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伯樂電泳儀使用方法及注意事項(xiàng)

閱讀:1065        發(fā)布時(shí)間:2024-10-23

伯樂電泳儀使用方法

1. 準(zhǔn)備工作

  • 材料準(zhǔn)備

    • 準(zhǔn)備好凝膠材料(瓊脂糖或聚丙烯酰胺)。

    • 準(zhǔn)備電泳緩沖液(如TBE或TAE)。

    • 準(zhǔn)備待分析的樣品(DNA、RNA或蛋白質(zhì))。

2. 制備凝膠

  1. 溶解凝膠材料

    • 根據(jù)需要稱取適量的瓊脂糖或聚丙烯酰胺。

    • 將其加入緩沖液中,加熱至溶解。

  2. 倒入模具

    • 將溶解后的凝膠倒入電泳模具,插入梳子以形成樣品孔,待凝膠固化。

3. 裝配電泳儀

  1. 去除梳子

    • 凝膠固化后小心取出梳子,形成樣品孔。

  2. 放置凝膠

    • 將凝膠放入電泳槽中,確保其與緩沖液接觸。

  3. 加入緩沖液

    • 在凝膠上方和槽內(nèi)加入適量的電泳緩沖液,確保樣品孔被覆蓋。

4. 加樣

  1. 準(zhǔn)備樣品

    • 將樣品與上樣緩沖液混合,準(zhǔn)備加樣。

  2. 加樣

    • 使用移液器將樣品小心地加入到樣品孔中,避免樣品混入相鄰孔。

5. 運(yùn)行電泳

  1. 連接電源

    • 確保電源與電泳儀連接正確。

  2. 設(shè)置電壓

    • 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求設(shè)置適合的電壓(一般為80-150 V)。

  3. 啟動(dòng)電泳

    • 打開電源,觀察電泳過程中的樣品遷移情況。

6. 觀察與終止電泳

  • 監(jiān)測(cè)樣品的遷移,適時(shí)記錄電泳時(shí)間。

  • 電泳結(jié)束后,關(guān)閉電源,小心取出凝膠。

7. 后處理

  1. 染色

    • 根據(jù)需要使用染色液(如EB或SYBR)染色樣品。

  2. 成像

    • 使用成像設(shè)備記錄電泳結(jié)果。

注意事項(xiàng)

  1. 安全性

    • 確保電源線無損壞,避免接觸水分,操作時(shí)注意電氣安全。

  2. 樣品量

    • 加樣時(shí)避免過量,以免影響分離效果。

  3. 緩沖液

    • 確保緩沖液配比正確,以保證分離效果的可靠性。

  4. 電泳時(shí)間與電壓

    • 根據(jù)樣品類型和凝膠厚度選擇合適的電泳時(shí)間和電壓,避免過度電泳導(dǎo)致樣品擴(kuò)散。

  5. 觀察進(jìn)度

    • 在電泳過程中,適時(shí)觀察樣品的遷移情況,確保實(shí)驗(yàn)進(jìn)展符合預(yù)期。

  6. 凝膠處理

    • 在取出凝膠時(shí)小心,避免損壞凝膠結(jié)構(gòu)。

遵循以上使用方法和注意事項(xiàng),可以有效提高電泳實(shí)驗(yàn)的成功率和結(jié)果的可靠性。


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