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杭州實(shí)了個(gè)驗(yàn)生物科技有限公司
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賽默飛 Countess 3 FL 熒光細(xì)胞計(jì)數(shù)儀詳解
一、產(chǎn)品概述
賽默飛（Thermo Fisher Scientific）推出的 Countess 3 FL 熒光細(xì)胞計(jì)數(shù)儀是一款結(jié)合了圖像識(shí)別技術(shù)和熒光成像功能的自動(dòng)化細(xì)胞計(jì)數(shù)設(shè)備，旨在提供快速、準(zhǔn)確的細(xì)胞分析解決方案。相較傳統(tǒng)手動(dòng)血球計(jì)數(shù)板，Countess 3 FL 在操作便捷性、計(jì)數(shù)精度及多參數(shù)分析能力方面有較大提升，適用于多種細(xì)胞實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景，包括細(xì)胞活率檢測(cè)、轉(zhuǎn)染效率評(píng)估、GFP表達(dá)觀察等。
二、主要功能特點(diǎn)
熒光與明場(chǎng)雙通道支持
Countess 3 FL 配備明場(chǎng)和雙熒光通道，可同時(shí)進(jìn)行明場(chǎng)成像和多色熒光檢測(cè)。支持常見(jiàn)熒光標(biāo)記如GFP、RFP、DAPI等，用戶(hù)可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇適配的熒光模塊，以實(shí)現(xiàn)更豐富的細(xì)胞分析功能。
圖像識(shí)別技術(shù)與自動(dòng)分析
儀器內(nèi)置高分辨率成像系統(tǒng)與算法，可自動(dòng)識(shí)別細(xì)胞輪廓、計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)目并評(píng)估細(xì)胞大小和形態(tài)特征。相比手動(dòng)計(jì)數(shù)，它減少了人為誤差，提高了重復(fù)性和可靠性。
細(xì)胞活率評(píng)估
借助Trypan Blue 染色法，Countess 3 FL 可通過(guò)明場(chǎng)檢測(cè)實(shí)現(xiàn)活細(xì)胞與死細(xì)胞的自動(dòng)判別，提供活率百分比數(shù)據(jù)。這對(duì)于細(xì)胞凍存復(fù)蘇后檢測(cè)，或藥物處理后的細(xì)胞生存狀況評(píng)估，具有實(shí)際意義。
用戶(hù)自定義參數(shù)
儀器提供圖像處理參數(shù)的可調(diào)控設(shè)置，如細(xì)胞直徑范圍、熒光強(qiáng)度閾值等，適用于不同種類(lèi)的細(xì)胞。這樣，使用者可以根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需求優(yōu)化分析條件。
直觀觸控界面與數(shù)據(jù)導(dǎo)出功能
Countess 3 FL 配備7英寸彩色觸控屏，界面設(shè)計(jì)簡(jiǎn)潔，操作邏輯清晰，便于非專(zhuān)業(yè)人員快速上手使用。分析完成后，用戶(hù)可通過(guò)USB端口導(dǎo)出圖像和數(shù)據(jù)文件（如CSV格式），方便后續(xù)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與圖文記錄。
模塊化熒光通道
儀器支持即插即用的LED熒光模塊，用戶(hù)可根據(jù)需要進(jìn)行更換和升級(jí)。這種模塊化設(shè)計(jì)提升了設(shè)備的靈活性，減少了不同實(shí)驗(yàn)間設(shè)備切換的負(fù)擔(dān)。
三、技術(shù)參數(shù)
顯示屏幕：7 英寸電容觸控屏
成像系統(tǒng)：高分辨率 CMOS 攝像頭
熒光通道：支持2個(gè)熒光LED模塊（用戶(hù)可選）
檢測(cè)范圍：10^4 至 10^7 個(gè)細(xì)胞/mL
分析時(shí)間：約10秒完成一次細(xì)胞計(jì)數(shù)
樣本體積：10 μL（推薦）
數(shù)據(jù)輸出方式：USB導(dǎo)出、可連接至電腦使用 Countess 軟件
兼容性：兼容 Countess 專(zhuān)用載玻片或一次性載玻片
四、典型應(yīng)用場(chǎng)景
細(xì)胞活率檢測(cè)
在細(xì)胞凍存、復(fù)蘇、藥物處理、污染監(jiān)測(cè)等環(huán)節(jié)，快速評(píng)估細(xì)胞活率是常規(guī)步驟之一。Countess 3 FL 結(jié)合 Trypan Blue 染色，提供自動(dòng)化活細(xì)胞比例分析。轉(zhuǎn)染效率分析
利用熒光通道觀察GFP或其他熒光標(biāo)記蛋白的表達(dá)情況，可實(shí)現(xiàn)對(duì)轉(zhuǎn)染效率的評(píng)估。儀器可自動(dòng)識(shí)別熒光細(xì)胞數(shù)量及其在總細(xì)胞群體中的比例。細(xì)胞分選前質(zhì)量評(píng)估
在進(jìn)行流式細(xì)胞儀分選前，需先判斷樣本細(xì)胞狀態(tài)和濃度，Countess 3 FL 可快速提供所需參數(shù)，幫助優(yōu)化樣本預(yù)處理過(guò)程。干細(xì)胞、免疫細(xì)胞實(shí)驗(yàn)前處理
在免疫治療或干細(xì)胞研究中，計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響較大，自動(dòng)化計(jì)數(shù)設(shè)備可以提高流程效率。
五、操作流程簡(jiǎn)述
用吸頭取10 μL細(xì)胞樣本，混勻染料（如Trypan Blue）
將混合液滴入一次性計(jì)數(shù)載玻片
插入儀器載玻片槽
選擇計(jì)數(shù)模式（明場(chǎng)或熒光）
儀器自動(dòng)采圖分析，顯示結(jié)果并可保存或?qū)С?/p>
六、維護(hù)與兼容性
Countess 3 FL 在日常使用中僅需基本清潔與定期檢查。由于其無(wú)復(fù)雜光學(xué)對(duì)準(zhǔn)和封閉結(jié)構(gòu)，維護(hù)相對(duì)簡(jiǎn)單。儀器兼容賽默飛提供的標(biāo)準(zhǔn)一次性載玻片，也可選配可重復(fù)使用載玻片以節(jié)約消耗品成本。
七、優(yōu)缺點(diǎn)簡(jiǎn)要對(duì)比
| 優(yōu)點(diǎn) | 說(shuō)明 |
|---|---|
| 自動(dòng)識(shí)別與分析 | 提高效率，減少人為差異 |
| 熒光檢測(cè)功能 | 滿足轉(zhuǎn)染、標(biāo)記等多種實(shí)驗(yàn)需求 |
| 操作界面簡(jiǎn)潔 | 非專(zhuān)業(yè)人員易于掌握 |
| 可更換熒光模塊 | 支持實(shí)驗(yàn)多樣性 |
| 數(shù)據(jù)導(dǎo)出便捷 | 有助于記錄和進(jìn)一步分析 |
| 限制 | 說(shuō)明 |
|---|---|
| 熒光模塊需單獨(dú)購(gòu)買(mǎi) | 成本略高 |
| 對(duì)部分貼壁細(xì)胞識(shí)別率不如流式系統(tǒng) | 有時(shí)需優(yōu)化設(shè)定 |
| 不支持全自動(dòng)樣本進(jìn)樣 | 樣本需人工加樣 |
八、結(jié)語(yǔ)
賽默飛 Countess 3 FL 熒光細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在多樣化實(shí)驗(yàn)需求日益增長(zhǎng)的背景下，提供了一種兼具成像、計(jì)數(shù)和熒光分析的細(xì)胞分析工具。它適用于科研、教學(xué)及部分生物醫(yī)藥開(kāi)發(fā)領(lǐng)域的日常細(xì)胞計(jì)數(shù)工作。盡管其功能尚不能替代流式細(xì)胞儀的多參數(shù)分析能力，但在便捷性、速度和經(jīng)濟(jì)性方面具有其自身特點(diǎn)，適合中小規(guī)模實(shí)驗(yàn)室或高通量前處理使用。
