Thermo Scientific直接進行PCR的裂解試劑(Lyse and GoPCR Reagent)可以快速釋放細胞內(nèi)DNA并直接進行PCR。使用聚合酶鏈式反應(PCR)技術可以對DNA序列進行快速的分析。該體系即使含有蛋白、RNA以及非特異性DNA等其他的細胞成分也可進行DNA擴增反應，所以可以不純化DNA而直接在細菌細胞裂解液中進行DNA擴增，擴增兼容的試劑僅需要裂解細胞并釋放模板DNA即可。以往實驗表明利用直接進行PCR的裂解試劑(Lyse andGo PCR Reagent)能夠制備直接用于PCR的質粒DNA樣本。已經(jīng)驗證過，利用該試劑的的配方，體系與幾種可商購的Taq聚合酶兼容。也可以使用該試劑來裂解包括酵母、一些動植物組織、全血以及培養(yǎng)的哺乳動物細胞，制備直接用于PCR的DNA。由于其通用性，直接進行PCR的裂解試劑(Lyse and Go PCR Reagent)是分子生物學研究中一種十分有用的工具。
產(chǎn)品特點：
- 能夠裂解細菌、酵母、培養(yǎng)的細胞、血液、組織和植物等樣品，以裂解物為模板直接進行聚合酶鏈式反應(PCR)。
- 不需要昂貴、費時的DNA純化試劑盒。
- 在一個管中進行裂解和擴增，減少了污染的風險和操作的問題。
- 簡單、高效、快速的方法，是高通量篩選的。
利用Thermo Scientific直接進行PCR的裂解試劑（Lyse and Go PCR Reagent）對大腸桿菌進行裂解之后直接進行PCR擴增。利用含有或者不含0.8 kb cDNA(大鼠)插入物的pUSE載體分別來轉化大腸桿菌JM-109細胞，在LB培養(yǎng)平板中37°C培養(yǎng)過夜。用移液器槍頭挑取一部分克隆，加入5μl直接進行PCR的裂解試劑(Lyse and Go PCR Reagent)重懸。在加入擴增混合物之前將懸浮液加熱到95°C并持續(xù)2分鐘。按照以下程序進行PCR反應：94°C變性30秒、55°C退火45秒、68°C延伸60秒。同時，以10納克含有相同插入物的pUSE載體作為正對照。利用1%瓊脂糖凝膠電泳分析擴增的產(chǎn)物。泳道M是KiloBase DNA分子標記。每個反應進行三次重復。
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