諾博萊德 植物細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)提取試劑盒-非酶法

植物細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)提取試劑盒 蛋白提取

產(chǎn)品貨號(hào)：P5126

產(chǎn)品名稱：植物細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)提取試劑盒-非酶法

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

中文名稱：植物細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)提取試劑盒-非酶法

規(guī)格：100T ; 50T

儲(chǔ)存條件：2-8℃，1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder P5126 植物細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)提取試劑盒-非酶法

適用樣本：植物

注：

1. 蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲(chǔ)存。開蓋使用后-20℃儲(chǔ)存。

2. 蛋白酶抑制劑在 2-8℃低溫時(shí)是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。

3. 試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完！

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

植物細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)提取試劑盒提供全套試劑，適用于從各種植物細(xì)胞和各種實(shí)體植物組織，如葉片、根、種子等植物組織中提取細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)。提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便，可在1小時(shí)內(nèi)完成。制備的細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)不僅純度高，保持天然活性，而且絕少交叉污染。

本試劑盒采用非酶法提取，非酶法的提取試劑盒提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便，速度快，可在1小時(shí)內(nèi)完成，而且絕少交叉污染，但是回收率相比酶法稍低。酶法提取制備的回收率提高，純度高，保持天然活性，但是耗時(shí)較長(zhǎng)。請(qǐng)根據(jù)實(shí)際需要選擇試劑盒。

自備試劑和儀器：

離心機(jī)、振蕩器、渦旋混勻器、勻漿器/勻漿機(jī)、移液器、冰箱、冰盒，PBS緩沖液、離心管、吸頭、細(xì)胞篩（100μm）、一次性手套

使用方法（僅供參考）：

一、使用注意事項(xiàng)：

1、旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時(shí)液體灑落。

2、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。

3、可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要加入蛋白酶抑制劑。如果添加，可以在1ml提取液A中加入2μl蛋白酶抑制劑，充分混勻。

二、操作步驟

1、取洗凈擦干后并去除葉梗和粗脈的200-500mg植物組織樣本用手shu剪刀盡可能剪碎。

2、加入1ml提取液A，用勻漿機(jī)/勻漿器充分勻漿。

【注】：

●勻漿盡可能充分。

●根據(jù)需要處理的樣品數(shù)量準(zhǔn)備蛋白提取液，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。

培養(yǎng)細(xì)胞直接收集細(xì)胞后用Dounce勻漿器勻漿即可，勻漿后加提取液A混勻后直接進(jìn)行以

下步驟離心。

用Dounce勻漿器勻漿20-30次即可。每上下一個(gè)來(lái)回為一次。

3、將勻漿液用100μm 細(xì)胞篩過(guò)濾。

【注】：

沒(méi)有細(xì)胞篩過(guò)濾條件，可以不過(guò)濾。也可將勻漿液稍微靜置，吸取上清勻漿液，丟棄大的

組織碎片、纖維等沉淀。

有些含黏液較多的樣品可能難以吸取，可以將1ml吸頭尖稍微剪掉一點(diǎn)使用。

勻漿液量較黏稠不好過(guò)濾時(shí)，可以補(bǔ)加PBS緩沖液后過(guò)濾。

4、將濾液置4℃振蕩20-30分鐘。

【注】：

使用振蕩器/搖床的較低轉(zhuǎn)速，提取液能輕微晃動(dòng)即可。

沒(méi)有振蕩條件也可以不振蕩，在2-8℃靜置，稍微延長(zhǎng)處理時(shí)間，中間每隔幾分鐘用移液

器吹打混勻。

5、在800×g條件下離心5分鐘。

6、移除上清至另一干凈離心管。上清為細(xì)胞質(zhì)部分，沉淀為細(xì)胞核。

7、在沉淀中加入200μl冷的核保存液B，混勻。

【注】：

也可以不用試劑盒中的核保存液，根據(jù)下游實(shí)驗(yàn)需要用相應(yīng)的其他緩沖液保存或者直接用于下游實(shí)驗(yàn)。

8、將上述樣品于2-8℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。

【注】：

存放后需要收集細(xì)胞核使用時(shí)，在2000×g離心10分鐘收集沉淀即可。

注意事項(xiàng)：

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得優(yōu)良實(shí)驗(yàn)效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時(shí)試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并che底清除殘留清潔劑。

6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

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