諾博萊德 RNase-Free DNase Set

DNase I 膜上消化試劑盒（RNase free）

DNase I 膜上消化試劑盒 RNA提取配套產(chǎn)品

目錄號：91314

產(chǎn)品內(nèi)容

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準

產(chǎn)品簡介

本產(chǎn)品兼容所有硅膠膜離心柱式RNA提取試劑盒，用來去除基因組DNA。

任何總RNA提取試劑盒都無法wan全避免DNA的微量殘留，GeneBetter 的RNA提取產(chǎn)品，由于采取了本公司du特的緩沖體系和特殊硅膠吸附膜，可以去除絕大多數(shù)的DNA污染，所以一般不用進行DNase I消化。但是對于一些敏感的下游實驗，需要去除微量的DNA殘留，可以購買本公司DNase I膜上消化試劑盒（RNase free），直接在離心柱的吸附膜上面消化殘留的DNA，然后經(jīng)過漂洗、洗脫，得到純凈的RNA。

注意事項：

DNase Buffer含Mn2+，可能有輕度發(fā)黃發(fā)黑，甚至黑色沉淀為正?，F(xiàn)象，顛倒混勻后正常使用即可。

DNase是非常敏感，易物理損壞變性喪失活性，所以不要漩渦混勻DNase I和工作液。輕輕吹打或者上下顛倒混勻混合液。每次在抽提RNA抽提前配置新鮮的工作液。

操作步驟

第一次使用前請先在漂洗液 RW 中加入zhi定量無水乙chun，詳見瓶身的標簽。

提示：所有離心步驟必須在室溫（15~25℃）下進行。

1. 按照正常RNA提取步驟操作，裂解混合物加入RNA吸附柱并離心后（RNA包括殘留DNA被吸附到離心柱硅膠膜上），在加入去蛋白液RW1

步驟之前，按照以下步驟操作。

2. DNase I工作液配制：取45μl DNase Buffer和5μl DNase I至新的RNase-Free離心管中，輕輕吹打混勻。（處理多個樣品，按照比例放大）

注意：如果殘留DNA過多導(dǎo)致消化不wan全，可按比例加大使用mei量來提高消化效果（如 90μl DNase I buffer 和 10μl RNase free DNase I）。

3. 加入350μl去蛋白液RW1，室溫放置1min，13,000 rpm 離心30sec，倒棄濾液。

4. 向RNA吸附膜的中央加入50μl的DNase I工作液，室溫放置15min。

5. 加入350μl 去蛋白液RW1，13,000 rpm離心30sec，倒棄濾液。

6. 下接“加入500μl 漂洗液 RW"步驟等后續(xù)步驟。如果是其它公司的試劑盒，則接最后的一個漂洗液漂洗等后續(xù)步驟。

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