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在細胞生物學(xué)研究中，細胞增殖和毒性檢測是評估細胞狀態(tài)、藥物效果以及生物材料生物相容性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。SuperKine™ 超敏型細胞增殖檢測試劑（CCK-8）以其優(yōu)勢，為科研人員提供了一種高效、靈敏且操作簡便的檢測方案。

一、CCK-8 檢測原理：揭秘細胞活性的鑰匙

CCK-8 檢測試劑的核心成分是高度水溶性的四唑鹽 WST-8。在細胞內(nèi)脫氫酶的作用下，WST-8 被還原生成橙色的水溶性甲瓚產(chǎn)物。這一反應(yīng)與細胞代謝活性緊密相關(guān)，活細胞數(shù)量越多，產(chǎn)生的甲瓚產(chǎn)物也越多，其顏色越深。通過比色測定，可在 450 nm 波長下準確測量吸光度，進而定量分析細胞增殖情況或評估細胞毒性。

與傳統(tǒng)四唑鹽（如 MTT、XTT、MTS 或 WST-1）相比，CCK-8 的檢測靈敏度顯著提高，能夠檢測到更少量的細胞增殖變化，這使其在低細胞密度或增殖緩慢的細胞系檢測中表現(xiàn)出色。同時，CCK-8 試劑具有良好的水溶性，避免了 MTT 等試劑在使用過程中可能出現(xiàn)的沉淀問題，確保了檢測結(jié)果的準確性和重復(fù)性。

二、操作流程：簡便快速的檢測體驗

細胞準備與接種

根據(jù)實驗需求，將細胞懸液接種于合適的培養(yǎng)板中。對于貼壁細胞，使用胰蛋白酶消化并計數(shù)后，以適當(dāng)密度接種；懸浮細胞則直接接種。細胞數(shù)量依據(jù)實驗?zāi)康亩?，一般每?103 - 10? 個細胞是常見起始密度。

試劑添加與孵育

待細胞貼壁或穩(wěn)定懸浮后，按照試劑盒說明，向每孔加入相應(yīng)量的 CCK-8 試劑。孵育時間依據(jù)細胞種類和實驗?zāi)康亩ǎǔ?1 - 4 小時。孵育過程在常規(guī)細胞培養(yǎng)箱（37℃、5% CO?）中進行，無需特殊設(shè)備。

檢測

孵育結(jié)束后，使用酶標儀在 450 nm 波長下測量吸光度，部分酶標儀需扣除 630 nm 處的背景吸光度，以提高檢測準確性。若無酶標儀，也可使用普通分光光度計，但需確保比色皿光程一致且操作規(guī)范。

三、應(yīng)用領(lǐng)域：多場景的科研助力

CCK-8 檢測試劑廣泛應(yīng)用于細胞增殖研究，可用于評估細胞在不同營養(yǎng)條件、生長因子或藥物刺激下的增殖能力。在細胞毒性檢測中，通過檢測藥物處理后細胞的代謝活性變化，CCK-8 可有效評估化合物的潛在毒性。此外，CCK-8 還適用于高通量篩選，在藥物研發(fā)中高效篩選大量化合物，快速確定具有期望活性的候選藥物。

四、優(yōu)勢與注意事項：確保實驗成功的關(guān)鍵

優(yōu)勢

• 高靈敏度：CCK-8 對細胞增殖變化的檢測靈敏度高于傳統(tǒng)方法，能更精準地反映細胞生長狀態(tài)，尤其適用于低細胞密度或增殖緩慢的細胞系。

• 操作簡便：無需特殊設(shè)備或復(fù)雜操作流程，僅需簡單的細胞培養(yǎng)和比色測定步驟，即可完成檢測。

• 水溶性佳：避免了 MTT 等試劑的沉淀問題，減少了操作中的誤差，提高了檢測結(jié)果的可靠性。

• 兼容性強：與多種常用的細胞培養(yǎng)基和試劑兼容，不影響細胞正常生理狀態(tài)，可在常規(guī)細胞培養(yǎng)條件下進行檢測。

注意事項

• 孵育時間優(yōu)化：根據(jù)細胞類型和實驗?zāi)康膬?yōu)化孵育時間，確保甲瓚產(chǎn)物生成量與細胞數(shù)量呈線性關(guān)系。建議進行預(yù)實驗確定最佳孵育時間。

• 避免光照：CCK-8 試劑和生成的甲瓚產(chǎn)物對光敏感，操作過程中應(yīng)盡量避光，以防止光對檢測結(jié)果產(chǎn)生影響。

• 細胞狀態(tài)監(jiān)測：在實驗過程中，定期觀察細胞的生長狀態(tài)和形態(tài)變化，確保細胞處于良好的生理狀態(tài)。若發(fā)現(xiàn)細胞出現(xiàn)異常，應(yīng)及時調(diào)整實驗條件。

• 試劑保存：CCK-8 試劑應(yīng)嚴格按照試劑盒說明書的要求保存，通常為避光、2 - 8℃保存，避免試劑失效或活性降低。