色譜是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。Thermo液相色譜柱柱效受柱內(nèi)外因素影響,為使色譜柱達(dá)到*效率,除柱外死體積要小外,還要有合理的柱結(jié)構(gòu)(盡可能減少填充床以外的死體積)及裝填技術(shù)。即使的裝填技術(shù),在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不一樣的,靠近管壁的部位比較疏松,易產(chǎn)生溝流,流速較快,影響沖洗劑的流形,使譜帶加寬,這就是管壁效應(yīng)。這種管壁區(qū)大約是從管壁向內(nèi)算起30倍粒徑的厚度。在一般的液相色譜系統(tǒng)中,柱外效應(yīng)對柱效的影響遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于管壁效應(yīng)。
Thermo液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70 kg/cm2 時,也可采用厚壁玻璃或石英管,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應(yīng),不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度,其效果與拋光相同。還有使用熔融硅或玻璃襯里的,用于細(xì)管柱。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板,是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金,孔徑0.2~20µm(5~10µm),取決于填料粒度,目的是防止填料漏出。
如何保證Thermo液相色譜柱良好的壽命?
1,認(rèn)真閱讀色譜柱的使用說明書,*按說明書的描述使用與保養(yǎng)色譜柱。選購柱子時一定要使用填料填充良好的色譜柱。
2,盡量減少壓力的波動,避免機械及熱沖擊。在色譜柱分析樣品的過程中盡量使用保護柱和在線過濾器
3,經(jīng)常以強溶劑沖洗色譜柱,充分過濾樣品和流動相,盡量避免雜質(zhì)微粒和強溶劑殘留.
4,盡量使用穩(wěn)定的固定相,在PH值為6-8的中等PH值操作時,使用有機緩沖溶液,色譜柱的使用溫度小于40度,若為硅膠基質(zhì)的液相色譜柱,應(yīng)保持流動相的PH范圍在2-8之間zui穩(wěn)妥.
5,流動相中含有緩沖溶液時,應(yīng)注意用95:5的水及有機溶劑過渡,有機溶劑不能低于5%。不能用純水去沖洗疏水的硅膠基質(zhì)的色譜柱.流動相一定要為純水的話請選購經(jīng)過極性封尾或者極性鑲嵌的反相色譜柱.
6,不用色譜柱需儲存時,沖洗掉鹽和緩沖液,用純有機流動相保存,為乙腈.
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