液相色譜儀的系統(tǒng)由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中做相對運動時,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
液相色譜儀分類
一、液固吸附色譜
1.1分離原理 液固色譜是基于各組分吸附能力的差異進行混合物分離的,其固定相是固體吸附劑。
1.2固定相 吸附色譜固定相可以分為極性和非極性兩大類。
1.3流動相 流動相要求:
1.3.1選用的溶劑應(yīng)當(dāng)與固定相互不相溶,并能保持色譜柱的穩(wěn)定性
1.3.2選用的溶劑應(yīng)有高純度,以防所含微量雜質(zhì)在柱中積累,引起柱性能的改變。
1.3.3選用的溶劑性能應(yīng)與所使用的檢測器相匹配,如果使用紫外吸收檢測器,就不能選用在檢測波長
二.液液分配色譜
1.1分離原理 分配色譜法的原理與液液萃取相同,都是分配定律。
1.2固定相 分配色譜固定相由兩部分組成,一部分是惰性載體,另一部分是涂漬在惰性載體上的固定液。
1.3流動相 分內(nèi)色譜中,要求流動相盡可能不與固定液互溶
1.4應(yīng)用 既能分離極性化合物,又能分離非極性化合物。由于不同極性鍵合固定相的出現(xiàn),分離的選擇性可得到很好的控制。
三.鍵合相色譜
1.1分離原理:正鍵合相色譜分離遠離:使用的是極性鍵和固定性,溶質(zhì)在此類固定相上的分離機理屬于分配色譜.反鍵合相色譜分離原理:使用的是極性較小的鍵合固定相,其分離機理可用疏溶劑作用理論來解釋。固定相 ,按極性大小可分為非極性、弱極性、極性化學(xué)鍵合固定相三種。流動相,正鍵合相色譜中,采用和反相液液分配色譜相似的流動相,流動相的主體成分為己烷或庚烷。反相鍵合相色譜中,流動相采用和反相液液分配色譜相似的流動相,主題為水。
應(yīng)用,正鍵合相色譜法的應(yīng)用:多用于分離各類極性化合物如染料、*、多巴胺、氨基酸等;反鍵合相色譜法的應(yīng)用:由于操作簡單,穩(wěn)定性和重復(fù)性好,該方法已成為一種通用型液相色譜分析方法。在生物化學(xué)、醫(yī)藥研究、食品分析和環(huán)境污染分析等多個領(lǐng)域有了很大的應(yīng)用和發(fā)展。液相色譜儀
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