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簡單介紹細胞凍存的方法

來源:繪辛生物科技(上海)有限公司   2017年01月16日 11:02  
細胞凍存的方法:
       
1.細胞:選對數(shù)生長期細胞,收集細胞24小時前換液一次。
 
  2.計數(shù):按常規(guī)方法把細胞制成細胞懸液,計數(shù),令細胞密度達5×106/ml,離心去上清,吸入離心管中。
 
  3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。
 
  4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細胞懸液。
 
  5.封口:用塑料安剖時擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細檢查,定要封嚴,必要時可浸入藍色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細胞名稱,凍存日期,以便日后查找。

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