細胞在培養(yǎng)過程中如果環(huán)境不適合其生長就會出現(xiàn)部分細胞的老化現(xiàn)象。這是干細胞培養(yǎng)的一個難點也是經(jīng)常出現(xiàn)的問題。
干細胞老化表現(xiàn)：
細胞胞漿內(nèi)特別是在核區(qū)附近出現(xiàn)黑色顆粒，表示細胞開始出現(xiàn)老化；
細胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)空泡，則表明該細胞已老化或者已經(jīng)開始分化（在全部細胞中出現(xiàn)少數(shù)老化細胞是正常的）；
細胞立體感逐漸消失，細胞間的間隔不清，部分細胞扁平狀，細胞的形狀趨向多樣；
貼壁性減退，出現(xiàn)一些漂浮的細胞；
部分分泌強的細胞分泌物增多，細胞表面會比較臟；
細胞增殖速度明顯下降，分裂相的細胞明顯減少。
干細胞老化的原因和預(yù)防：
接種密度的影響：部分干細胞具有一定的分泌性能，能夠分泌一些對細胞有支持能力的因子類物質(zhì)；所以必須維持一定的接種密度，否則會導(dǎo)致細胞增殖減慢，zui后出現(xiàn)老化；
消化過度：消化細胞時會對細胞的表面蛋白有較強的損傷，所以消化的時間不能過長，使用合適濃度和pH值的消化酶，否則會導(dǎo)致細胞老化和分化；
合適的密度的時候就要傳代：細胞如果過密，接觸抑制作用會導(dǎo)致細胞的活力減弱并影響增殖導(dǎo)致老化；
使用合適的血清和培養(yǎng)基：不同的干細胞對培養(yǎng)基特別是血清的要求不同，所以使用不同的培養(yǎng)用的血清進行篩選，尋找該干細胞培養(yǎng)的血清是預(yù)防細胞老化，維持細胞正常生長的重要保證。

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