Calu-1細胞,Calu-1細胞株的復蘇方法
產品名稱:Calu-1細胞
中文名稱:鱗狀細胞癌細胞
貨號:Calu-1
規(guī)格:1~3*106細胞/25cm2培養(yǎng)瓶
上海蒂科生物 細胞株、血清、培養(yǎng)基、 各種細胞培養(yǎng)相關試劑,開學酬賓*中,更多產品,更大優(yōu)惠,敬請!!
1.預熱培養(yǎng)用液把已經配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。
2.用75酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。
3.正確擺放使用的器械保證足夠的操作空間不僅便于操作而且可減少污染。
4.點燃酒精燈注意火焰不能太小。
5.準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶放入微波爐內高火8分鐘再次消毒。
6.取出預熱好的培養(yǎng)用液取出已經預熱好的培養(yǎng)用液用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內。
7.從培養(yǎng)箱內取出細胞注意取出細胞時要旋緊瓶蓋用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面再在鏡下觀察細胞。
8.打開瓶口將各瓶口一一打開同時要在酒精燈上燒口消毒。
二.胰蛋白酶消化
1.加入消化液小心吸出舊培養(yǎng)液用PBS清洗沖洗加入適量消化液胰蛋白酶液注意消化液
的量以蓋住細胞*消化溫度是37℃。
2. 顯微鏡下觀察細胞倒置顯微鏡下觀察消化細胞若胞質回縮細胞之間不再連接成片表明此時細胞
消化適度。
3.吸棄消化液加入培養(yǎng)液棄去胰蛋白酶液注意更換吸管加入新鮮的培養(yǎng)液。
三.吹打分散細胞
1.吹打制懸用滴管將已經消化細胞吹打成細胞懸液。
2.吸細胞懸液入離心管將細胞懸液吸入10ml離心管中。1.預熱培養(yǎng)用液把已經配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。
2.用75酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。
3.正確擺放使用的器械保證足夠的操作空間不僅便于操作而且可減少污染。
4.點燃酒精燈注意火焰不能太小。
5.準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶放入微波爐內高火8分鐘再次消毒。
6.取出預熱好的培養(yǎng)用液取出已經預熱好的培養(yǎng)用液用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內。
7.從培養(yǎng)箱內取出細胞注意取出細胞時要旋緊瓶蓋用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面再在鏡下觀察細胞。
8.打開瓶口將各瓶口一一打開同時要在酒精燈上燒口消毒。
二.胰蛋白酶消化
1.加入消化液小心吸出舊培養(yǎng)液用PBS清洗沖洗加入適量消化液胰蛋白酶液注意消化液
的量以蓋住細胞*消化溫度是37℃。
2. 顯微鏡下觀察細胞倒置顯微鏡下觀察消化細胞若胞質回縮細胞之間不再連接成片表明此時細胞
消化適度。
3.吸棄消化液加入培養(yǎng)液棄去胰蛋白酶液注意更換吸管加入新鮮的培養(yǎng)液。
三.吹打分散細胞
1.吹打制懸用滴管將已經消化細胞吹打成細胞懸液。
2.吸細胞懸液入離心管將細胞懸液吸入10ml離心管中。1.預熱培養(yǎng)用液把已經配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。
2.用75酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。
3.正確擺放使用的器械保證足夠的操作空間不僅便于操作而且可減少污染。
4.點燃酒精燈注意火焰不能太小。
5.準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶放入微波爐內高火8分鐘再次消毒。
6.取出預熱好的培養(yǎng)用液取出已經預熱好的培養(yǎng)用液用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內。
7.從培養(yǎng)箱內取出細胞注意取出細胞時要旋緊瓶蓋用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面再在鏡下觀察細胞。
8.打開瓶口將各瓶口一一打開同時要在酒精燈上燒口消毒。
二.胰蛋白酶消化
1.加入消化液小心吸出舊培養(yǎng)液用PBS清洗沖洗加入適量消化液胰蛋白酶液注意消化液
的量以蓋住細胞*消化溫度是37℃。
2. 顯微鏡下觀察細胞倒置顯微鏡下觀察消化細胞若胞質回縮細胞之間不再連接成片表明此時細胞
消化適度。
3.吸棄消化液加入培養(yǎng)液棄去胰蛋白酶液注意更換吸管加入新鮮的培養(yǎng)液。
三.吹打分散細胞
1.吹打制懸用滴管將已經消化細胞吹打成細胞懸液。
2.吸細胞懸液入離心管將細胞懸液吸入10ml離心管中。
3.平衡離心平衡后將離心管放入臺式離心機中以1000轉/分鐘離心6-8分鐘。
4.棄上清液加入新培養(yǎng)液棄去上清液加入2ml培養(yǎng)液用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液。
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