手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號(hào)：chem17
掃碼關(guān)注視頻號(hào)
在這種方法中，需合成一系列末端相互重疊的肽鏈，每段都對(duì)應(yīng)于蛋白抗原線狀序列中的一小段，并將它們排列于固相上。用檢測(cè)抗體識(shí)別這些固相肽鏈，與之結(jié)合的特異性抗體，采用酶標(biāo)記的二抗檢測(cè)。這種方法快速、成功率高。如果使用的抗體在免疫印跡反應(yīng)中效果較好，此法所得結(jié)果清晰，并能識(shí)別那些耐變性的蛋白表位。在實(shí)際實(shí)驗(yàn)中并非所有的抗體均能很好的反應(yīng)，抗體僅對(duì)那些具有耐變性特性的蛋白質(zhì)反應(yīng)較好。
系列肽鏈的設(shè)計(jì)
如果時(shí)間和經(jīng)費(fèi)都允許，合適的肽鏈應(yīng)該zui大可能地覆蓋所要作圖的表位（每段肽鏈15～20個(gè)氨基酸），而且每段肽鏈遞增1個(gè)氨基酸。這樣的系列將能對(duì)大多數(shù)抗體地作圖。因此，必須用500條肽鏈才能覆蓋具有500個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)。較為實(shí)際的做法是設(shè)計(jì)15個(gè)氨基酸長(zhǎng)，相互具有5個(gè)氨基酸重疊，或者20個(gè)氨基酸長(zhǎng)，相互具有10個(gè)氨基酸重疊的系列肽鏈。如此則只需要100條15個(gè)氨基酸的肽鏈序列或者50條20個(gè)氨基酸的肽鏈序列。如果基因片段分析已經(jīng)確定表位在100個(gè)氨基酸以內(nèi)，那么，就應(yīng)建立15—20個(gè)氨基酸的肽鏈庫。
系列肽鏈的設(shè)計(jì)
羧基末端的設(shè)計(jì)：如果要設(shè)計(jì)一套肽掃描系列，其中包括有該蛋白抗原的遠(yuǎn)端羧基末端，設(shè)計(jì)2個(gè)較短的針對(duì)羧基端的肽鏈，因?yàn)槟承┛贵w可以識(shí)別肽鏈游離的羧基。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購(gòu)中心