1 材料與方法
1.1 標本 經(jīng)EDTA-K2抗凝的無償獻血者全血標本。
1.2 試劑 抗-D血型
1.3 器材 平底微孔反應(yīng)板(國產(chǎn));平板離心機;MSK酶標板振蕩器;酶標儀;進口微量移液器。
1.4 方法 微板法:將抗-D血清25μl和稀釋成一定比例的待檢紅細胞10μl加到平底微孔反應(yīng)板中,用振蕩儀在一定條件下振蕩均勻,再經(jīng)平板離心機以1000r/min,離心1min,再用振蕩儀在一定條件下振蕩懸浮。凝集的紅細胞塊散于孔底,不凝集的紅細胞呈混懸狀態(tài)。用酶標儀630nm波長自動掃描,獲取每孔的相對透光率(Tc)。試管法和平板法同常規(guī)血型鑒定方法。
2 結(jié)果
2.1 振蕩條件的選擇 在混勻及懸浮過程中各選8個標本(陰、陽性標本各4孔),在微孔中用上述方法加入抗-D血清和紅細胞,,振蕩時間分別為5、10、15、20、25、30s,振幅大小與震蕩時間成反比,zui終選擇混勻條件500轉(zhuǎn)15s,懸浮條件600轉(zhuǎn)/每分鐘振幅20s。
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