酚紅在ATCC細胞培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑，一般情況下，可以通過酚紅的指示作用判斷培養(yǎng)基的pH值，中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色；但低血清或是無血清細胞培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通細胞培養(yǎng)基中的酚紅含量不同，不能通過肉眼觀察或通過經驗來判定pH值，建議使用pH計進行測定。酚紅通常對含血清的細胞培養(yǎng)基的生物制品質量并不會產生明顯影響，也可通過純化技術去除，但酚紅在無血清細胞培養(yǎng)基中可能帶來胞內鈉/鉀失衡，影響細胞生長，這種作用能被血清所中和或減輕。因此，酚紅并不是細胞培養(yǎng)基中必需的一種成份，很多國外的疫苗或抗體企業(yè)在過程中都使用無酚紅細胞培養(yǎng)基。
碳酸氫鈉在ATCC細胞培養(yǎng)基中主要是作為緩沖系統，此外還具有調節(jié)滲透壓的作用。通常產品使用說明中的碳酸氫鈉推薦量是一個標準、安全量，是在科學的基礎上根據實踐經驗所得，但是由于不同的細胞系（株）不同，同一株細胞適應環(huán)境也可能不同（細胞耐受性不同等），且存在的地域性水質差異等，在實際過程中也可稍作改動，但使用者需做相應的檢測（理化及細胞試驗等）。
HEPES是一種非離子緩沖液，在pH 7.2 ～7.4范圍內具有較好的緩沖能力，其在高濃度時對一些細胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉（0.34 g /L）共用，以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。其安全濃度范圍是10～25 mmol/L。
丙酮酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是，如果沒有葡萄糖的話，細胞也可以代謝丙酮酸鈉。
谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，4℃下放置1周可分解50%，使用中單獨配制，置-20℃冰箱中保存，使用前加入ATCC細胞培養(yǎng)液中。