INS-1細(xì)胞還是比較好長(zhǎng)的，培養(yǎng)條件是RPMI1640+0.11g/L L-Glutamine +0.11g/L 丙酮酸鈉+5.6 MMOL/L 葡萄糖+ 50umol/L 2 –mercaptoethanol + 10%FBS ，細(xì)胞本身就是成片生長(zhǎng)的，細(xì)胞對(duì)胰酶比較敏感，如果消化不好，細(xì)胞狀態(tài)會(huì)受到很大的影響，甚至?xí)毁N壁死亡，我一般用0.05%胰酶-EDTA消化半分鐘就好了

1000mmol=1mol=質(zhì)量/分子量，你計(jì)算好需要的總體積然后根據(jù)濃度換算出需要的質(zhì)量，即克數(shù)！
細(xì)胞培養(yǎng)階段是用普通1640，也就是含糖11.1mmol/L的培養(yǎng)基，給不同糖濃度刺激時(shí)，換用無(wú)糖1640配置需要的糖濃度

INS-1細(xì)胞的培養(yǎng)條件是：Cell culturing： INS-1 cells were cultured to near confluence in RPMI-1640 medium with 11 mmol/l D-glucose supplemented with 10% fetal calf serum (FCS), 100 U/ml penicillin, 100 ｕg/ml streptomycin, 10 mmol/l HEPES, 2 mmol/l L-glutamine, 1 mmol/l sodium pyruvate, and 50 ｕmol/l b-mercaptoethanol. 可見(jiàn)對(duì)葡萄糖濃度的要求是常規(guī)RPMI-1640的GLU濃度，值得一提的是該細(xì)胞對(duì)2-ME（b-mercaptoethanol）巰基乙醇確實(shí)依賴的，如果不添加，細(xì)胞難以生長(zhǎng)。

INS-1細(xì)胞是不難培養(yǎng)的，只是培養(yǎng)基成份多了一些，各位在配培養(yǎng)基的時(shí)候要多加小心。
一、細(xì)胞株說(shuō)明
1. 細(xì)胞名稱：大鼠胰島素瘤細(xì)胞
2. 生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
3. 培養(yǎng)條件：RPMI1640+0.11g/L L-Glutamine +0.11g/L 丙酮酸鈉+5.6 MMOL/L 葡
萄糖+ 50umol/L 2 –mercaptoethanol + 10%FBS
4. 傳代比例：1:3-1:6
5. 培養(yǎng)環(huán)境：37℃，5%CO2,95%O2

賣胰島素細(xì)胞的ATCC

通過(guò)ATCC現(xiàn)能買到的胰島細(xì)胞株有6種，你上面所提的INS-1就有。我就介紹一下該株的一些特性：
Asfari建立了INS-1、INS-2胰島細(xì)胞系，其母系是RINm5f（來(lái)自于放射線誘導(dǎo)的胰島素瘤）。RIN細(xì)胞與淋巴細(xì)胞共培養(yǎng)于含β-疏基乙醇的培養(yǎng)基，Asfari發(fā)現(xiàn)一些漂浮的細(xì)胞聚集成團(tuán)，形態(tài)與RIN相異，分離及純化這些細(xì)胞即得到INS，這些細(xì)胞的活力必須依賴于β-疏基乙醇的存在，其zui大的特點(diǎn)是其激素分泌與體內(nèi)的胰島細(xì)胞相似，具有葡萄糖刺激的胰島素分泌。

一般而言，細(xì)胞株胰島素分泌功能越強(qiáng)，轉(zhuǎn)染效率越差，越容易受損、死亡；相反，若細(xì)胞株分化差，分泌胰島素功能很差，轉(zhuǎn)染效率可能越高，越不容易死亡。另外，若用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)，濃度要低，否則可能死很多細(xì)胞；雖然效率可能低些，但是存活率高。

Hans E. Hohmeier , Christopher B. Newgard et al. Cell lines derived from pancreatic islets.Molecular and Cellular Endocrinology 2004,121–1.

葡萄糖刺激的胰島素分泌(glucose-stimulated insulin secretion,GSIS)功能
另外，一位經(jīng)驗(yàn)豐富的老師（diabetes等雜志發(fā)表過(guò)文章）提出忠告: 具有GSIS功能的胰島細(xì)胞不容易穩(wěn)定轉(zhuǎn)染(非常困難) ，瞬時(shí)轉(zhuǎn)染會(huì)容易些。

我養(yǎng)過(guò)三種胰島B細(xì)胞系分別是RIN5F,INS-1,MIN6,前兩者是大鼠胰島B細(xì)胞系,MIN6是小鼠的, 其中養(yǎng)的是RIN5F,該細(xì)胞系一般用來(lái)做信號(hào)傳導(dǎo)方面的研究. INS-1要復(fù)雜一些,據(jù)我所知,INS-1的GSIS功能不好,一般不能用來(lái)做功能試驗(yàn),但是在另有一個(gè)INS-1E細(xì)胞系,具有一定的GSIS功能,高糖時(shí)insulin分泌量/低糖約為3-5倍, MIN6是其中GSIS功能的,但也是zui難養(yǎng)的,用它做實(shí)驗(yàn)是一種折磨,我是用原代的胰島細(xì)胞來(lái)做GSIS功能試驗(yàn)的.
另外,在進(jìn)行質(zhì)粒轉(zhuǎn)染時(shí),胰島素分泌功能越好的細(xì)胞轉(zhuǎn)染愈難.用脂質(zhì)體法是不可能轉(zhuǎn)染上原代胰島細(xì)胞的.

我知道華中科技大生物物理和化學(xué)研究所一是用元代細(xì)胞作轉(zhuǎn)染；另外他們有ins-1胰島β細(xì)胞株進(jìn)行腺病毒轉(zhuǎn)染，他們實(shí)驗(yàn)室的老板是徐濤教授；方法相對(duì)成熟。

HIT-15是錯(cuò)誤寫(xiě)法, 應(yīng)是HIT-T15, 中間多一個(gè)T, 另外該細(xì)胞系的GSIS的zui高倍數(shù)是２倍，這種細(xì)胞用于功能研究欠考慮．也不是*的功能檢測(cè)β細(xì)胞系
目前大多用于機(jī)制及信號(hào)傳導(dǎo)研究