色譜柱是運用于色譜儀系統(tǒng)中起著分離作用的儀器,是色譜儀分析系統(tǒng)的核心部件,色譜柱柱效的高低影響著檢測速率的快慢以及檢測結(jié)果的性。因此,為了提高色譜柱的柱效,液相色譜儀分析檢測的靈敏性,了解液相色譜柱的選購技巧尤為重要。
選擇液相色譜柱時需要考慮的主要因素包括:鍵合相、粒徑、孔徑、碳載量,下面來一一介紹:
1、鍵合相:確定了正反相后基本就簡單了,正相很簡單,我們重點討論下反相,C18主要分離非極性和弱極性物質(zhì),因為是鍵合硅膠,所以C18也分好幾種有常規(guī)的如C18-A,耐純水的OL Apple C18-AQ、耐酸堿的OL Apple C18-EX等,如果發(fā)現(xiàn)C18保留很弱,調(diào)整流動相也不行,這個時候可以考慮C8甚至C4等。
2、粒徑:色譜法追求的是、高分辨、高速等。目前來說亞2um填料或者2UM核殼填料是很理想的模型,基本具備“三高”特征尤其是高速,線速度不在影響分離度,不過附帶的缺點就是高壓,要升級相應(yīng)的硬件,成本高昂,需要謹(jǐn)慎考慮。5um填料普遍,目前來說可以勝任各種日常檢測,即使有特殊要求,3um色譜填料基本上也能全覆蓋,不過該模型下線速度和分離度是成反比的。
3、孔徑:目前很多60~300A都有,甚至更高或者更低的。開孔的填料多了個類似分子篩功能,所以選擇孔徑一定要關(guān)注分子量,蛋白(分子量5000以上)一般都需要在160A以上,多肽(分子量上限在3000左右)在120A左右,一般快速柱孔徑都很小,可以縮短樣品路徑。所以上還有無孔硅膠柱子,也很適合蛋白分離,解決蛋白分子量大和太粘稠堵住孔徑問題。
4、碳載量:快速柱碳載量很低,如A家等,省時間,省溶劑,但分析部分復(fù)雜樣品如中藥等有點力不從心,這個時候可以考慮英國OL Apple色譜柱,碳載量15~23%,碳載量數(shù)值就像河床的水草,越高代表越密集,保留樣品能力越強,越有可能分離開難分離物質(zhì)。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。