用抗人抗體包被微珠

來源：上海源葉生物科技有限公司 2011年01月04日 09:03

[器材和試劑]

● 磁珠（Dynabeads M-450，甲苯磺?；罨?，Dynal）

● 硼酸鹽緩沖液（50mmol/L硼酸鈉，pH 9．5）

每抗人Fc多克隆抗體（免疫純的羊抗人IgG Fc片段特異性抗體，Pierce）

● 磁分離器（Dynal）

● PBS（磷酸鹽緩沖液： 2mmol/L NaH₂PO₄ H₂0， 16mmol/L Na₂HPO₄·2H₂0， 15mmol/L NaCl）

● PBBS （PBS， 0．1％BSA）

● 硫柳汞（Sigma）

[方法]

1．將500ul已充分混懸的磁珠轉(zhuǎn)移到1支Eppendorf管中。將該管置于磁分離儀中，除去液體。

2．將磁珠懸浮于1m1硼酸鹽緩沖液中，混合，再如上除去上清液。

3．將磁珠懸浮在含有75ug抗人Fc特異性多克隆抗體的硼酸鹽緩沖液中，定容到1m1；在轉(zhuǎn)輪上，室溫孵育24h。

4．用磁分離儀去除上清液，將磁珠轉(zhuǎn)移到一個(gè)含10mlPBBS的Falcon管中。4℃旋轉(zhuǎn)洗滌磁珠，10分鐘1次，30分鐘3次，過夜。每次洗滌后，將含有磁珠的試管插入合適的磁分離儀中除去上清。

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