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如何使ATCC細(xì)胞培養(yǎng)物適應(yīng)培養(yǎng)基?

來源:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司   2017年09月21日 12:51  

許多ATCC細(xì)胞系容易適應(yīng)無血清培養(yǎng)基和無蛋白培養(yǎng)基,而對(duì)環(huán)境要求過高的其它細(xì)胞卻難以適應(yīng)變化,這就需要更為專業(yè)的方法來適應(yīng)變化。而根據(jù)細(xì)胞系的特性,有兩種方法可使細(xì)胞適應(yīng)無血清培養(yǎng)基。*種方法是連續(xù)適應(yīng)/循序隔絕法;另一種方法是直接適應(yīng)。
連續(xù)適應(yīng)/循序隔絕法
*種方法是連續(xù)適應(yīng)/循序隔絕法。通過一系列的血清還原步驟,使細(xì)胞適應(yīng)無血清培養(yǎng)基。這是優(yōu)先選用的方法,且不對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境形成太過惡劣的變化。
連續(xù)適應(yīng)/循序隔絕法——方法1
使原培養(yǎng)基內(nèi)的細(xì)胞連續(xù)地經(jīng)過以下幾個(gè)階段:
階段1:75%補(bǔ)加血清的培養(yǎng)基或25%無血清培養(yǎng)基
階段2:50%補(bǔ)加血清的培養(yǎng)基或50%無血清培養(yǎng)基
階段3:25%補(bǔ)加血清的培養(yǎng)基或75%無血清培養(yǎng)基
階段4:100%無血清培養(yǎng)基

連續(xù)適應(yīng)/循序隔絕法——方法2
1、以原培養(yǎng)基中的相同濃度,將血清加入無血清培養(yǎng)基內(nèi)。將細(xì)胞從含血清的原培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到加了血清的無血清培養(yǎng)基,此時(shí)應(yīng)注意要提培養(yǎng)系統(tǒng)中的細(xì)胞密度。讓細(xì)胞有一個(gè)適應(yīng)過渡期。
2、按照方法1,緩慢地降低血清濃度,使ATCC細(xì)胞在每個(gè)階段有適應(yīng)的時(shí)間。
3、一旦血清補(bǔ)加量降為0,在用于進(jìn)行分析或其他操作前,讓細(xì)胞培養(yǎng)物具有數(shù)個(gè)適應(yīng)過渡期。
規(guī)格:    Multi-class antibodies    Anti-CA II /FITC  熒光素標(biāo)記碳酸酐酶2抗體IgG     0.2ml
規(guī)格:    Multi-class antibodies    Anti-CA II /FITC  熒光素標(biāo)記碳酸酐酶2抗體IgG     0.2ml
規(guī)格:    Multi-class antibodies    Anti-CA125  卵巢癌抗原抗體     0.1ml
規(guī)格:    Multi-class antibodies    Anti-CA125/Biotin  生物素標(biāo)記兔抗人CA125抗原抗體IgG     0.2ml
規(guī)格:    Multi-class antibodies    Anti-CA125/Biotin  生物素標(biāo)記兔抗人CA125抗原抗體IgG     0.2ml
規(guī)格:    Multi-class antibodies    Anti-CA125/FITC  熒光素標(biāo)記卵巢癌抗原抗體IgG     0.2ml
規(guī)格:    Multi-class antibodies    Anti-CA125/FITC  熒光素標(biāo)記卵巢癌抗原抗體IgG     0.2ml
規(guī)格:    Multi-class antibodies    Anti-CA15-3/FITC  熒光素標(biāo)記癌相關(guān)抗原抗體IgG     0.2ml
ATCC細(xì)胞

 

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