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微生物菌種保藏小知識

來源:上海一研生物科技有限公司   2017年09月30日 11:45  

微生物菌種是重要的食用菌資料,必須很好保藏,做到不死亡,不衰退,不被雜菌污染,才能在上長期使用。保藏菌種的基本原理是使菌絲的生理代謝活動盡量降低,甚至進入休眠狀態(tài)。通常采用的手段是:低溫、干燥和減少氧氣供應(yīng)。

一、斜面低溫保藏

這是一種常用的而且是zui簡便的保藏方法。首先將要保藏的菌種移接到適宜的斜面培養(yǎng)基上。一般采用營養(yǎng)豐富的半合成培養(yǎng)基,如PDA培養(yǎng)基,麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基等。為了減少培養(yǎng)基水分蒸發(fā),延長保藏時間,可將瓊脂用量加到20.5%。在這些培養(yǎng)基中,再加入少許0.2%的K2HP04、KH2PO4、CaCO3等緩沖劑,以中和菌種在保藏過程中產(chǎn)生積累的有機酸。如果是保藏香菇和黑木耳菌種,應(yīng)把配方中的葡萄糖換成麥芽糖。用適宜溫度培養(yǎng)至菌絲長滿斜面,選擇菌絲生長健壯的試管,先用硫酸紙包扎好管口棉塞,再將若干支試管用牛皮紙包好。現(xiàn)在提倡用無菌膠塞代替棉塞,既可防止污染,又可隔絕氧氣,避免斜面干燥。具體做法是:選擇大小合適的橡皮膠塞,洗凈晾干,在75%酒精液中殺菌一小時,用無菌紗布吸去酒精,在火焰上燒去殘留的酒精液。于無菌條件下,將試管口在火焰上灼燒滅菌,拔去棉塞,換上膠塞,再用石蠟密封。放入4℃左右的電冰箱內(nèi)保存。每隔3~4個月轉(zhuǎn)管一次。如果用膠塞石蠟封口,轉(zhuǎn)管期可延遲至6個月。草菇菌種不耐低溫,菌絲在5℃以下就死亡。保藏溫度應(yīng)捉高到10℃~15℃。

二、液體石蠟保藏

將要保藏的菌種接入前面介紹的馬鈴薯半合成培養(yǎng)基(3)上,培養(yǎng)至菌絲長滿斜面,選擇生長健壯的備用。然后選用化學(xué)純的液體石蠟裝入三角瓶內(nèi),裝至瓶體的1/3處,塞上棉塞后包扎,1kg/cm2滅菌1小時。滅菌后,放在40℃恒溫箱中,使水分蒸發(fā)至石蠟液透明為止。冷卻后在無菌箱(室)內(nèi),以無菌操作方法,用無菌吸管分別注入待保存的各個試管微生物菌種內(nèi),注入量以淹過斜面1cm為宜。然后塞以橡皮膠塞,用蠟封口,直立于試管架上,放入4℃冰箱中或常溫下保藏。此法可保藏5~7年,但1~2年移植一次。使用時,不必倒去石蠟油,只要用接種針從斜面上挑取小塊菌絲即可(但要盡量少帶石蠟油)。余下的母種可繼續(xù)保藏。由于挑出移接的菌絲塊沾有石蠟,故生長微弱,必須轉(zhuǎn)接幾次才能恢復(fù)正常。
HPLC≥98%    異鼠李素-3-O-新橙皮苷    Isorhamnetin-3-O-neohespeidoside    20mg/支
HPLC≥98%    紫蓳靈; 紫堇醇靈堿    (+)-Corynoline    20mg/支
HPLC≥98%    高麗槐素; 馬卡因    (±)-Maackiain; dl- Maackiain    20mg/支
HPLC≥98%    秦皮苷; 白蠟樹苷    Fraxin;Fraxoside; Paviin    20mg/支
HPLC≥98%    奇任醇,奇壬醇    Kirenol    20mg/支
HPLC≥98%    高良姜素    Galangin;3,5,7-Trihydroxyflavone    20mg/支
HPLC≥98%    比枯枯靈;畢靈堿;荷包牡丹堿    (+)-Bicuculline    20mg/支
HPLC≥98%    異槲皮苷    Isoquercitrin;Isoquercetin; Isoquercitroside    20mg/支
HPLC≥98%    乙酰紫堇靈; 乙酰紫堇醇靈堿    Acetylcorynoline    20mg/支
HPLC≥98%    三葉豆紫檀苷    Trifolirhizin;(-)-Maackiain-3-O-glucoside    20mg/支
微生物菌種

 

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