培養(yǎng)人類胚胎腫瘤細(xì)胞的研究者們發(fā)現(xiàn),核型正常的細(xì)胞在植板(plating)之后只有少數(shù)能夠分裂,而且它們的子細(xì)胞還會出現(xiàn)持續(xù)性的死亡,很少能形成可以長期增殖的克隆。
Sheffield大學(xué)的Peter Andrews教授和Daniel Coca教授領(lǐng)導(dǎo)研究團(tuán)隊,對單個人類胚胎干細(xì)胞進(jìn)行了延時成像,并由此鑒定了限制干細(xì)胞生長的主要瓶頸。研究顯示,在長期培養(yǎng)過程中發(fā)生了適應(yīng)性突變的干細(xì)胞,受到的生長限制有所緩解,能夠進(jìn)行更有效的擴(kuò)增。
Sheffield大學(xué)的Dr Ivana Barbaric說:“我們研究胚胎干細(xì)胞,是因為它們有成為任何細(xì)胞類型的潛力。通過體外培養(yǎng)獲得大量未分化的胚胎干細(xì)胞,是用這些細(xì)胞進(jìn)行治療的前提。問題是這些細(xì)胞在體外培養(yǎng)時容易大量死亡,擴(kuò)增效率比較低。”
“在長期體外培養(yǎng)的條件下,胚胎干細(xì)胞能夠通過自發(fā)突變,提高自己的生長能力。為了安全使用這些細(xì)胞進(jìn)行治療,我們需要了解培養(yǎng)條件對細(xì)胞的影響,以及細(xì)胞對此做出的適應(yīng)。”
研究人員將延時顯微成像、單細(xì)胞追蹤技術(shù)和數(shù)學(xué)模型結(jié)合起來,對普通胚胎干細(xì)胞和已經(jīng)適應(yīng)培養(yǎng)的干細(xì)胞進(jìn)行了比較。他們從中確定了影響克隆形成的三個主要瓶頸:植板后的細(xì)胞生存情況、細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂的情況、以及分裂后的細(xì)胞死亡情況。
研究顯示,在同樣的培養(yǎng)條件下,已經(jīng)適應(yīng)培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞在上述三個方面表現(xiàn)更好,能夠形成更多的克隆。此外,增加細(xì)胞間的接觸或者添加促進(jìn)細(xì)胞生存的化合物,也能緩解這三方面的問題。
5,5-二甲基-1-吡咯啉-N-氧化物;5,5-二甲基-1-氧化吡咯啉 3317-61-1 CAS號: 5,5-DiMethyl-1-pyrroline-N-oxide;DMPO 英文名稱:
5,6,7,8-四氫-2-萘酚;β-四氫萘酚 1125-78-6 CAS號: 5,6,7,8-Tetrahydro-2-naphthol;β-Tetralol;2-Tetralol;6-Hydroxy-1,2,3,4-tetrahydronaphthalene;6-Hydroxytetralein 英文名稱:
5,6-二甲基苯并咪唑 582-60-5 CAS號: 5,6-DiMethylbenziMidazole 英文名稱:
5,7,4’-三羥基黃酮(-20℃) 520-36-5 CAS號: Apigenin 英文名稱:
5.7-二羥基-4-甲氧基黃酮 480-44-4 CAS號: Acacetin 英文名稱:
5’-脫氧-5’-甲硫腺苷(-20℃) CAS號: NA 英文名稱:
501鍵合型硅膠擔(dān)體 CAS號: NA 英文名稱:
腫瘤細(xì)胞
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