克隆抗體技術

來源：上海研生實業(yè)有限公司 2011年03月15日 09:23

利用雜交瘤技術制備單克隆抗體（McAb）基本原理是根據(jù)三個原則：（1）淋巴細胞產生抗體的克隆選擇學說；（2）雜交瘤細胞保持雙方親代細胞特性化；（3）然后大量培養(yǎng)增殖，制備所需的McAb。

克隆抗體的產生

1. 動物體內誘生方法：目前McAb治療用或體外診斷用的多數(shù)尚采用這一方法制備。先在小鼠腹腔注射液體石蠟或福氏不*佐劑，一周后將雜交瘤細胞懸液注射腹腔，1～2周后，無菌抽取腹水，離心取上清液即可。

2.體外培養(yǎng)法：這是實驗室制備的方法。將雜交瘤細胞置培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，待培養(yǎng)液顏色改變或細胞過多開始死亡時，收集上清液，離心去掉碎片及細胞即可。另一種是雜交瘤細胞高密度培養(yǎng)法。

克隆抗體的純化及鑒定

目前常用的純化方法有鹽析、凝膠過濾、離子交換層析和辛酸提取等方法。

克隆抗體性質鑒定方法如放免測定、補體介導溶血試驗、ELISA、免疫酶、玫瑰花結形成試驗等，zui常用的為ELISA方法，一般先作定性試驗，如陽性，進一步作定量檢測。

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