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可見分光光度計的原理和使用方法

來源:上海棱光技術(shù)有限公司   2018年01月22日 10:36  
  可見分光光度計原理
  光是一種電磁波,具有一定的波長和頻率??梢姽獾牟ㄩL范圍在400~760nm,紫外光為200~400nm,紅外光為760~500000nm。可見光因波長不同呈現(xiàn)不同顏色,這些波長在一定范圍內(nèi)呈現(xiàn)不同顏色的光稱單色光。太陽或鎢絲等發(fā)出的白光是復(fù)合光,是各種單色光的混合光。利用棱鏡可將白光分成按波長順序排列的各種單色光,即紅、橙、黃、綠、青、藍(lán)、紫等,這就是光譜。有色物質(zhì)溶液可選擇性地吸收一部分可見光的能量而呈現(xiàn)不同顏色,而某些無色物質(zhì)能特征性地選擇紫外光或紅外光的能量。物質(zhì)吸收由光源發(fā)出的某些波長的光可形成吸收光譜,由于物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)不同,對光的吸收能力不同,可見分光光度計因此每種物質(zhì)都有特定的吸收光譜,而且在一定條件下其吸收程度與該物質(zhì)的濃度成正比,分光光度法就是利用物質(zhì)的這種吸收特征對不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析的方法。
  在比色分析中,有色物質(zhì)溶液顏色的深度決定于入射光的強(qiáng)度、有色物質(zhì)溶液的濃度及液層的厚度。當(dāng)一束單色光照射溶液時,入射光強(qiáng)度愈強(qiáng),溶液濃度愈大,液層厚度愈厚,溶液對光的吸收愈多,它們之間的關(guān)系,符合物質(zhì)對光吸收的定量定律,即Lambert-Bear 定律。這就是分光光度法用于物質(zhì)定量分析的理論依據(jù)。
  可見分光光度計注意事項
  1、該儀器應(yīng)放在干燥的房間內(nèi),使用時放置在堅固平穩(wěn)的工作臺上,室內(nèi)照明不宜太強(qiáng)。熱天時不能用電扇直接向儀器吹風(fēng),防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩(wěn)定。
  2、使用本儀器前,使用者應(yīng)該首先了解本儀器的結(jié)構(gòu)和工作原理,以及各個操縱旋鈕之功能。在未按通電源之前,應(yīng)該對儀器的安全性能進(jìn)行檢查,電源接線應(yīng)牢固,通電也要良好,各個調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應(yīng)該正確,然后再按通電源開關(guān)。
  可見分光光度計使用方法
  721可見分光光度計其波長范圍360~800nm,色散元件為三角棱形.
  1.檢查儀器各調(diào)節(jié)鈕的起始位置是否正確,接通電源開關(guān),打開樣品室暗箱蓋,使電表指針處于“0”位,預(yù)熱20min后,再選擇須用的單色光波長和相應(yīng)的放大靈敏度檔,用調(diào)“0”電位器調(diào)整電表為T=0%。
  2.蓋上樣品室蓋使光電管受光,推動試樣架拉手,可見分光光度計使參比溶液池(溶液裝入4/5高度,置*格)置于光路上,調(diào)節(jié)100%透射比調(diào)節(jié)器,使電表指針指T=100%。
  3.重復(fù)進(jìn)行打開樣品室蓋,調(diào)0,蓋上樣品室蓋,調(diào)透射比為100%的操作至儀器穩(wěn)定。
  4.蓋上樣品室蓋,推動試樣架拉手,使樣品溶液池置于光路上,讀出吸光度值。讀數(shù)后應(yīng)立即打開樣品室蓋。
  5.測量完畢,取出比色皿,洗凈后倒置于濾紙上晾干。各旋鈕置于原來位置,電源開關(guān)置于“關(guān)”,拔下電源插頭。
  6.可見分光光度計放大器各檔的靈敏度為:“l” ×1倍;“2”×10倍;“3”×20倍,靈敏度依次增大。由于單色光波長不同時,光能量不同,需選不同的靈敏度檔。選擇原則是在能使參比溶液調(diào)到T= 100%處時,盡量使用靈敏度較低的檔,以提高儀器的穩(wěn)定性。改變靈敏度檔后,應(yīng)重新調(diào)“0”和“100”。

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